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1066479423

银虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE跑完后蛋白染色的问题 已有5人参与

有没有人用G250染色的?配方是这样的:考马斯亮蓝G-250 100mg溶于 50ml 95%乙醇,加入 100ml 85%磷酸,用蒸馏水稀释到1000ml。效果好不好?
有人说这个配方是用来测蛋白浓度的,到底是染色还是测浓度?请大神给指点一下,非常感谢
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

一直用G250 效果很不错
100ml的水加100ml的磷酸,混匀,加100g硫酸铵溶解,然后加1.2g的G250,溶解,加水到800ml,再加200ml的甲醇到一升
室温可以用6个月以上,要一样一样的按照这个步骤加,不要全部放到一起溶解
固定液可以用甲醇乙酸来固定,染色之后脱色直接用水即可,效果很不错
4楼2014-12-06 01:29:49
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韩国斌

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我用R-250   0.25g/100mL,水:甲醇:醋酸=4:5:1     染色挺好的
2楼2014-12-05 18:51:14
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

一般大家都用R250,
G250也能用,这个G250和磷酸的配方比常规的配方要灵敏,可以检测到低浓度的蛋白,
但是染色时间比较长,而且用的脱色液似乎也有差别
还有,你确定配方里没有硫酸铵吗?
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2014-12-05 23:19:11
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

染色的是冰乙酸,甲醇
踏实
5楼2014-12-07 20:42:31
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