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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » SDS-PAGE跑完后蛋白染色的问题
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1066479423

银虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE跑完后蛋白染色的问题 已有5人参与

有没有人用G250染色的？配方是这样的：考马斯亮蓝G-250 100mg溶于 50ml 95%乙醇，加入 100ml 85%磷酸，用蒸馏水稀释到1000ml。效果好不好？
有人说这个配方是用来测蛋白浓度的，到底是染色还是测浓度？请大神给指点一下，非常感谢
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1楼 2014-11-26 17:14:44
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韩国斌

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我用R-250   0.25g/100mL，水：甲醇：醋酸=4:5:1     染色挺好的
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2楼2014-12-05 18:51:14
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

一般大家都用R250,
G250也能用，这个G250和磷酸的配方比常规的配方要灵敏，可以检测到低浓度的蛋白，
但是染色时间比较长，而且用的脱色液似乎也有差别
还有，你确定配方里没有硫酸铵吗？
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2014-12-05 23:19:11
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

一直用G250 效果很不错
100ml的水加100ml的磷酸，混匀，加100g硫酸铵溶解，然后加1.2g的G250，溶解，加水到800ml，再加200ml的甲醇到一升
室温可以用6个月以上，要一样一样的按照这个步骤加，不要全部放到一起溶解
固定液可以用甲醇乙酸来固定，染色之后脱色直接用水即可，效果很不错
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4楼2014-12-06 01:29:49
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

染色的是冰乙酸，甲醇
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踏实
5楼2014-12-07 20:42:31
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

G250染色弱些，但是背景很干净，你看下胶体考染。
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6楼2014-12-09 11:01:27
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