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半岛铁盒lsf

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 1396777
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专业: 药理学其他科学问题

[求助] 反转录后PCR扩不出目的条带已有7人参与

最近刚开始自己的实验，只有一个细胞株，想要从这个细胞株里提RNA，反转录后PCR扩出需要的目的基因序列。反转录后PCR用了GAPDH的引物做对照，GAPDH能够扩出来，但是需要的目的基因条带一直扩不出来，条带都没有。模板、引物、酶量、温度梯度都试过，一直失败中，希望大家多给指点指点，求分享经验！另外，如果我需要其他的目的基因序列，能也从这个细胞株里相同方法得到吗？谢谢

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1楼2014-11-11 11:09:47

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running113

木虫 (著名写手)

应助: 23 (小学生)
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帖子: 1202
在线: 267小时
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性别: GG
专业: 医学心理学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
半岛铁盒lsf(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-15 14:42:21

目的片段长度，引物，PCR程序，基因表达峰度，都有可能影响！
楼主可以试试。
最近也在扩目的带，很麻烦。

[ 发自小木虫客户端 ]

SCI我来了！！！

8楼2014-11-12 15:10:36

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