| 查看: 2592 | 回复: 13 | ||
散仙孔乙己新虫 (小有名气)
|
[求助]
怎样测蛋白质中的二硫键含量 已有1人参与
|
| 我现在打算测我样品中的二硫键含量，但是查文献发现测二硫键一般用NTSB溶液，配置很麻烦，我师姐之前也配过，失败了，所以我想请教一下有没有什么其他适的方法 |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
爱而成交» 猜你喜欢
【不合理蛙科研实验干货分享】石墨炉原子吸收测米铅镉铬小结
已经有0人回复
-
【不合理蛙科研实验交流分享】有机研萃促交流，协同创新拓前沿
已经有0人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有259人回复
-
【不合理蛙科研基础检测分享】原子吸收测元素，细调火焰稳基线
已经有0人回复
-
【不合理蛙科研实验干货分享】乳脂检测避坑记：温度离心定成败
已经有0人回复
-
【不合理蛙科研实验干货】微波消解测四素，钙铁锌硒一次清
已经有0人回复
-
【不合理蛙科研实验分享】梯度稀释控杂菌，限量计数不踩坑
已经有0人回复
-
[不合理蛙科研实验干货分享]实操食品微生物限量检测 筑牢实验严谨根基
已经有0人回复
-
[不合理蛙科研实验干货分享]实操食品微生物限量检测 筑牢实验严谨根基
已经有0人回复
-
[不合理蛙科研实验分享]实操粗脂肪测定实验 深耕食品科研基本功
已经有0人回复
-
[不合理蛙科研实验基础分享]实操索氏抽提法测脂肪 夯实实验硬本领
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请问有不含硫的蛋白质吗？
已经有3人回复
- 测定蛋白提取液中蛋白质的含量用什么方法测定
已经有6人回复
- 蛋白中巯基和二硫键的测定
已经有13人回复
- 蛋白质巯基的测定问题
已经有14人回复
- 二硫键的稳定性
已经有8人回复
- 麦麸蛋白含量15%，用来提蛋白做多肽能毕业么
已经有5人回复
- 求助，蛋白质与生物小分子结合
已经有5人回复
- 空气中氧化能增加由二硫键形成的二聚体蛋白质的量吗
已经有3人回复
- 用ellman法测定面粉中的二硫键
已经有11人回复
- 怀疑两个蛋白之间有非共价键结合力，如何解离？
已经有10人回复
- 关于多肽合成中二硫键的问题，着急！
已经有7人回复
- 富含巯基和二硫键的蛋白主要有哪些啊
已经有7人回复
- 想通过SPDP连接蛋白质和多肽，加入DTT会破坏蛋白质本身的二硫键吗
已经有11人回复
- 蛋白质大小的计算
已经有7人回复
- 蛋白质交联，那种物质可以促进蛋白质的硫氢键转化成二硫键
已经有6人回复
- 急寻求测定蛋白质二硫键（应用到NTSB试剂的实验方法）后的计算方法
已经有5人回复
- 蛋白质二硫键的形成
已经有4人回复
- 重组蛋白含半胱氨酸纯化过程如何保护巯基
已经有14人回复
- 蛋白浓缩沉淀？二硫键？
已经有9人回复
- 蛋白质二硫键打开
已经有4人回复
- 求助蛋白分子中二硫键的测定方法
已经有8人回复
- 考马斯亮蓝法测蛋白质含量
已经有12人回复
- 【求助】打断蛋白中二硫键的方法
已经有12人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE有可能看到蛋白二聚体吗？
已经有15人回复
2楼2014-11-10 20:02:26
散仙孔乙己
新虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1155.6
- 散金: 54
- 红花: 1
- 帖子: 145
- 在线: 29.8小时
- 虫号: 2659767
- 注册: 2013-09-16
- 专业: 食品加工技术
3楼2014-11-11 09:30:25
4楼2014-11-11 09:44:19
5楼2014-11-11 09:45:01
散仙孔乙己
新虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1155.6
- 散金: 54
- 红花: 1
- 帖子: 145
- 在线: 29.8小时
- 虫号: 2659767
- 注册: 2013-09-16
- 专业: 食品加工技术
6楼2014-11-11 09:59:42
散仙孔乙己
新虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1155.6
- 散金: 54
- 红花: 1
- 帖子: 145
- 在线: 29.8小时
- 虫号: 2659767
- 注册: 2013-09-16
- 专业: 食品加工技术
7楼2014-11-11 10:09:15
8楼2014-11-11 10:10:06
9楼2014-11-11 10:10:51
1012203014
金虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 334.1
- 散金: 31
- 红花: 3
- 帖子: 395
- 在线: 232.6小时
- 虫号: 1349300
- 注册: 2011-07-18
- 性别: GG
- 专业: 化学反应工程
|
测定总巯基含量时，15 mg蛋白样品溶解于5 mL含8 M 尿素的Tris-Gly 缓冲液（0.086 M Tris, 0.09 M Gly 和 0.04 M EDTA, pH 8.0）。测定自由巯基含量时，15 mg样品溶解于5 mL不含尿素的上述Tris-Gly 缓冲液中，而后加入50 μL Ellman 试剂 （DTNB, 即5,5-二硫基双2-硝基苯甲酸溶于Tris-Gly 缓冲液，4 mg/mL），在25℃条件下保温反应60 min, 离心（5000 g, 15 min），上清液在412 nm 处测定吸光值，以含Ellman 试剂的Tris-Gly 缓冲液为空白对照。 巯基含量的计算公式如下： SH (μmol/g) = 73.53×A ×D/C 式中：A —除去试剂空白后样品的吸光度值 D—稀释倍数 C—样品浓度（mg/mL） 问题1：上述公式中稀释倍数D是怎么算的（具体的式子），如果完全按照上述方法是不是就是1？ 问题2：我测的物质为毛发固体样品，二硫键含量在350μmol/g附近，此种测试方法是否具有可行性 问题3：由于毛发样品中含有非水溶性蛋白，又没哟测量二硫键含量的更好的方法 谢谢了  |
10楼2015-10-07 15:51:12