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1012203014

金虫 (正式写手)

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5楼: Originally posted by m919 at 2014-11-11 09:45:01
我提取的时候,也是自己配溶液。 没有觉得有多么难配。...

测定总巯基含量时,15 mg蛋白样品溶解于5 mL含8 M 尿素的Tris-Gly 缓冲液(0.086 M Tris, 0.09 M Gly 和 0.04 M EDTA, pH 8.0)。测定自由巯基含量时,15 mg样品溶解于5 mL不含尿素的上述Tris-Gly 缓冲液中,而后加入50 μL Ellman 试剂 (DTNB, 即5,5-二硫基双2-硝基苯甲酸溶于Tris-Gly 缓冲液,4 mg/mL),在25℃条件下保温反应60 min, 离心(5000 g, 15 min),上清液在412 nm 处测定吸光值,以含Ellman 试剂的Tris-Gly 缓冲液为空白对照。
巯基含量的计算公式如下:
SH (μmol/g) = 73.53×A ×D/C
式中:A —除去试剂空白后样品的吸光度值
D—稀释倍数
C—样品浓度(mg/mL)
问题1:上述公式中稀释倍数D是怎么算的(具体的式子),如果完全按照上述方法是不是就是1?
问题2:我测的物质为毛发固体样品,二硫键含量在350μmol/g附近,此种测试方法是否具有可行性
问题3:由于毛发样品中含有非水溶性蛋白,又没哟测量二硫键含量的更好的方法
谢谢了
奋斗!永不止步!
11楼2015-10-07 15:51:36
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爱而成交

金虫 (正式写手)

送红花一朵
x射线光能谱可测!

发自小木虫Android客户端
任凭周糟如何,学习与拼博的初心不变。
12楼2015-10-11 12:30:04
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缪缪喵喵喵

新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by m919 at 2014-11-10 20:02:26
有试剂盒的吧? 而且测-SH不是一样的吗?

请问买什么试剂盒可以测二硫键和巯基?
13楼2016-02-23 14:16:03
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小叶小花

新虫 (初入文坛)

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6楼: Originally posted by 散仙孔乙己 at 2014-11-11 09:59:42
贮藏期内我是用巯基变化来反应的,现在是表征我自己制备的抗冻剂(添加到鱼糜中)...

请问我现在也是做鱼糜,抗冻剂这块。测了活性巯基和总巯基。出现总巯基小于活性巯基的问题,请问你遇到过吗?二硫键的NTSB怎么配制啊??打扰了
14楼2017-04-03 09:44:43
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