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风子0824

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR阴性对照出现目的条带 已有4人参与

我在做pcr时,阴性对照出现了目的条带,考虑到可能的污染因素,把酶、水都换了新的,枪头、EP管都重新灭了,使用重新溶解的同一批合成的另一管引物 ,还是出现了阴性对照有条带的问题,跟目的条带一样大,400多bp,但同时做得另一对引物的阴性对照就没有条带,而且现在我只做阴性对照还是有条带(引物都是生工合成的)!现在很着急,我下面该怎么做,请高人指点~~谢谢大家!
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生物生物生物
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-10-29 22:16:09
换其他品牌或批次的酶试试吧,可能有效果。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-10-29 18:49:26
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dongdekun

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这个常遇到,原因很难说的清楚。有时阳性对照(质粒)能扩增;空白对照(H2O)能扩增,大小基本一致,条带较微弱;而阴性对照(非转基因材料)却不能扩增。。。很头疼的事儿。
我基本都是换引物搞定的。
3楼2014-11-02 12:58:55
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shaoxuemin

新虫 (初入文坛)

请问,这个问题你解决了吗?我也遇到了相同的问题,如果你已经解决了,就指导一下,谢谢。
4楼2017-02-15 22:23:53
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罗飞同学1993

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问楼主最后是怎么解决这个问题的?谢谢~最近也是遇到了同样的问题
科研新人
5楼2018-11-07 21:34:20
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earth小麦

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

求助楼主如何解决的  我现在同样的问题
6楼2019-02-26 20:47:56
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