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囧囧侠灬

木虫 (小有名气)

[求助] HPLC 中分析问题 已有3人参与

本人是第一次做HPLC发现了一些问题,解决不了,希望有人可以指点一下啊。
1)我测的样品是四氯双酚A,今天用甲醇溶了标品,流动相是甲醇:水=70:30,水相是0.1%的冰醋酸,在208nm紫外下,这些都是从文献中看到的,让我奇怪的是,做了三个浓度的标品,每次都会在8min到10min之间连续先出现一个很高的正峰,然后是一个很低的负峰,而且每次出现的都是几乎在同一时间点,面积也基本相同,不知道这是什么?
2)我准备用0.1M磷酸缓冲液稀释标品,可是按文献中所说,用含30%甲醇的磷酸缓冲液稀释时,加了甲醇的磷酸缓冲液会直接析出,可是人家文献中就是这么做的啊?
实在不理解,院里会做的人不在,剩下只会进样、测。求各位亲 告知一下啊。
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
囧囧侠灬: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-10-23 16:32:43
甲醇溶解样品,没问题
你把流动相里面的醋酸改成磷酸试试,另外,你的目标物是有紫外吸收的,检测波长没必要这么低
人生若只如初见...
4楼2014-10-23 10:14:57
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

★ ★ ★
囧囧侠灬(费姚永芬代发): 金币+3 2014-10-23 12:05:31
引用回帖:
5楼: Originally posted by 囧囧侠灬 at 2014-10-23 11:06:41
我的目标物就是纯品+甲醇,之前觉得是甲醇,可是今早做了个全波长扫描,发现有个最大峰大概就在210nm附近。
昨晚改了280nm试了,发现不同浓度标品都只出了一个大峰,但是峰面积没有什么改变,这是怎么回事呢...

出峰时间呢?空白的结果呢?
人生若只如初见...
6楼2014-10-23 11:51:13
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

引用回帖:
7楼: Originally posted by 囧囧侠灬 at 2014-10-23 15:09:03
改过之后 出峰的时间提前了  我一直用的都是标品,没有实际样  而且标线从来都没有跑平  都是上下上下那种。。  正常么...

换了波长没?换一个波长吧
人生若只如初见...
8楼2014-10-23 15:10:02
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