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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 质谱分析 » HPLC样品溶剂选择
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zhaohh1210

银虫 (小有名气)

[交流] HPLC样品溶剂选择

挥发油中组分鉴定与百分含量测定中，用甲醇-乙酸乙酯（1:1）溶解的样品，但流动相用的是乙腈-水梯度洗脱，不知道这样的鉴定结果是否可信。。。如果可信，做百分含量测定的话，直接扣除溶剂峰面积百分比就可以吗？
PS：测定波长220nm，4min之前出现了很强的溶剂峰，要检测的物质的保留时间在6min以后
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1楼 2013-12-08 18:10:04
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yjlrx

金虫 (小有名气)
★
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乙酸乙酯是出峰的，截止波长256，如果面积归一化法是不是要先算一下各个组分的相对相应因子，否则误差有点大吧？
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2楼2013-12-08 21:53:20
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张鑫1982

至尊木虫 (文坛精英)
★
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我没有看懂楼主发问的主题和具体描述之间的关系。

针对主题，溶剂的选择要求，说点不成熟的经验：
1、能够溶解待测物质
2、不影响待测物质检测
3、能够在一定时间范围内保持待测物质稳定

百分含量，那就是面积归一化，这里主要是待测物质之间的响应关系，除非你能够证明这些物质在一个色谱条件下响应因子差不多（具体多少需要实验数据，然后取舍），否则没有意义。如果楼主继续追问，我建议把基础课本再拿出来翻一翻，把“响应因子”这个词搞懂。
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3楼2013-12-09 12:33:45
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foralove

木虫 (初入文坛)
★
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挥发油用液相做？会不会GC更适合？

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4楼2013-12-09 21:19:50
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foralove

木虫 (初入文坛)
★
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鉴定没问题，保留时间定性，百分含量的话，你所说的应该是面积归一化法，这个只有各组分在检测器的响应因子接近才可以，否则误差很大。不知道挥发油组分多吗？组分不多、能买到标样的话，建议用外标法（或者内加法）分别定量

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5楼2013-12-09 21:27:29
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zhaohh1210

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yjlrx at 2013-12-08 21:53:20
乙酸乙酯是出峰的，截止波长256，如果面积归一化法是不是要先算一下各个组分的相对相应因子，否则误差有点大吧？

恩恩，只是粗略测定几个主成分的含量
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6楼2013-12-10 19:30:02
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zhaohh1210

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 张鑫1982 at 2013-12-09 12:33:45
我没有看懂楼主发问的主题和具体描述之间的关系。

针对主题，溶剂的选择要求，说点不成熟的经验：
1、能够溶解待测物质
2、不影响待测物质检测
3、能够在一定时间范围内保持待测物质稳定

百分含量，那就是 ...

谢谢！
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7楼2013-12-10 19:30:37
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senoya

铜虫 (初入文坛)
★
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溶剂影响很小，因为你的进样量很小，对色谱影响不大。如果不放心的话可以用B相溶解物质进行比对。定量的话需要加入内标，用相对峰面积的比值进行定量。
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8楼2014-01-16 10:18:00
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