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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr产物问题
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chicktrick

铁虫 (初入文坛)

[求助] pcr产物问题 已有1人参与

最近在克隆基因 老师一共给了三个基因 现在其中有一个基因 根据开放阅读框设计出来的引物克隆出来的条带时有时无 有条带的时候会出两条带 一条2500左右的目的条带和一条1800左右的条带 条带也很清晰明亮 没有条带的时候呈弥散样或者集中聚集到200-100bp左右的位置 前天又做了一次 只出现了1800bp位置的条带 请各位指点一下究竟问题何在 第一张图是最开始跑的胶 第二张是前天跑的 其中前九个是相关的泳道 10-11无关 12 是d2000marker  第三张是其间没有条带的胶 其中1泳道是marker d2000 2 4 泳道是用回收产物做的模板 3 5 泳道是正常的体系
pcr产物问题
20140906.jpg


pcr产物问题-1
pcr 20141017 primer6.jpg


pcr产物问题-2
primer6.jpg
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1楼 2014-10-20 10:57:25
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-20 19:47:16
第三张图，PCR产物做模版时你稀释了多少倍的？
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2楼2014-10-20 14:53:58
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chicktrick

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuderong at 2014-10-20 14:53:58
第三张图，PCR产物做模版时你稀释了多少倍的？

十倍之后取了1ul
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3楼2014-10-20 15:04:23
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chicktrick at 2014-10-20 15:04:23
十倍之后取了1ul...

稀释倍数大一点看看
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4楼2014-10-20 19:12:13
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chicktrick

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liuderong at 2014-10-20 19:12:13
稀释倍数大一点看看...

其实现在的问题就是为什么时出时不出 出的时候条带也没有什么异常现象
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5楼2014-10-22 09:39:46
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