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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求指导！要测序，长度为1500左右，是pcr产物直接测序好还是连接转化测序比较好？
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aounao

新虫 (初入文坛)

[求助] 求指导！要测序，长度为1500左右，是pcr产物直接测序好还是连接转化测序比较好？ 已有4人参与

是对一个细菌测序，测序结果就是用来做分析，是从各个地方取样来分析序列，分析dna的多样性，构建系统发育树等等，是直接用pcr产物测序好还是连接转化比较好？
如果用pcr产物测序的话，是不是必须要提取dna来跑pcr，因为之前测序是做的菌液pcr然后连接转化等等。
谢谢师兄师姐的知道！
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1楼 2014-10-09 17:43:55
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 鼓励交流 2014-10-10 12:27:18
这要看你想要的结果了，如果你要求1500 bp序列全部准确的话，需要克隆到载体上然后采用通用引物进行正反向测序；如果你要求只是中间一段是准确的话，可以对PCR产物进行测序。
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rainwater
5楼2014-10-10 10:18:12
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aounao

新虫 (初入文坛)
怎么木有人。。。。
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2楼2014-10-09 19:01:46
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Merrylegs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 鼓励交流 2014-10-10 12:27:14
一般来说用质粒或含质粒的菌液测序，效果要比PCR测序好。
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3楼2014-10-09 19:09:49
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aounao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Merrylegs at 2014-10-09 19:09:49
一般来说用质粒或含质粒的菌液测序，效果要比PCR测序好。

谢谢你！
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4楼2014-10-10 09:26:49
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