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cyofxy

新虫 (初入文坛)

[求助] QPCR的溶解曲线中的这种小峰是否是非特异性扩增? 已有4人参与

新人刚开始做qpcr,退火温度为58℃时,发现有一个目的基因的溶解曲线的主峰前面有一个小峰,把退火温度提高到60℃后仍然有一个小峰,其他基因没有这个情况。请教一下各位前辈,这种峰是反应了非特异性扩增么?这种情况是重新设计引物,还是先跑胶,明确是否有非特异性扩增后再考虑要不要重新设计引物?
谢谢各位啦!

这张是58℃:



这张是60℃:


再次感谢各位!

QPCR的溶解曲线中的这种小峰是否是非特异性扩增?
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QPCR的溶解曲线中的这种小峰是否是非特异性扩增?-1
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Merrylegs

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我觉得非特异峰不太明显,应该问题不大。
5楼2014-10-09 19:07:37
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查看全部 8 个回答

zhangyunjing

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-08 12:31:29
跑个琼脂糖电泳看看吧,上样量多些
rainwater
2楼2014-10-08 08:44:22
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20084032134

银虫 (小有名气)

亲,问一下你用哪个型号的仪器做的呢?我最近用ABI7300在做,可是自动分析的软件不好使!
我看你的图感觉还是效果不是很好,可能引物不太好吧
永不言弃
3楼2014-10-08 19:22:52
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cyofxy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 20084032134 at 2014-10-08 19:22:52
亲,问一下你用哪个型号的仪器做的呢?我最近用ABI7300在做,可是自动分析的软件不好使!
我看你的图感觉还是效果不是很好,可能引物不太好吧

也是abi的,具体型号没注意啊
4楼2014-10-09 15:46:23
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