应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 提取肉类DNA
81/1返回列表
查看: 1455  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

a599209150

新虫 (初入文坛)

[求助] 提取肉类DNA 已有2人参与

曲拉通X-100（Triton X-100 ）可以作为肉类破膜剂吗？
可以的话具体用多大浓度，对PCR有没有影响？谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-09-28 17:35:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

koujie1986

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2014-09-28 18:49:57
可以的，但是浓度要自己试了才晓得对后续试验有没有影响。我觉得你可以考虑市面上常见的鼠尾直接PCR试剂盒，无需提取基因组就可以直接裂解组织做PCR。里面的裂解体系比较稳定。只是这些试剂盒适用于快速检测，后续PCR的目的片段超过1Kb可能扩不出来。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-09-28 17:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a599209150

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by koujie1986 at 2014-09-28 17:53:08
可以的，但是浓度要自己试了才晓得对后续试验有没有影响。我觉得你可以考虑市面上常见的鼠尾直接PCR试剂盒，无需提取基因组就可以直接裂解组织做PCR。里面的裂解体系比较稳定。只是这些试剂盒适用于快速检测，后续P ...

我是想用曲拉通X-100破膜后，加蛋白酶K，提取出DNA后，进行等温检测，不知道这样可不可以？谢谢。
赞一下 回复此楼
3楼2014-09-29 08:08:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a599209150

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by koujie1986 at 2014-09-28 17:53:08
可以的，但是浓度要自己试了才晓得对后续试验有没有影响。我觉得你可以考虑市面上常见的鼠尾直接PCR试剂盒，无需提取基因组就可以直接裂解组织做PCR。里面的裂解体系比较稳定。只是这些试剂盒适用于快速检测，后续P ...

亲，俺提取的是羊肉的DNA，是否有快速简洁的方法啊
赞一下 回复此楼
4楼2014-09-29 09:54:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

koujie1986

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-09-29 11:18:23
鼠尾胶原蛋白多一点，相对肉类 核酸含量也少一点。你想啊，难裂解的都可以直接裂解了做PCR，更何况容易裂解的。
Triton X-100破膜加蛋白酶裂解这个想法是可以的，只是Triton X-100的添加量要自己试一下，而且蛋白酶裂解完了以后要95度灭活。从我们实验室测试的结果来看，裂解产物添加到PCR体系中只要保证Triton X-100终浓度小于1%就可以了。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-09-29 10:12:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a599209150

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by koujie1986 at 2014-09-29 10:12:32
鼠尾胶原蛋白多一点，相对肉类 核酸含量也少一点。你想啊，难裂解的都可以直接裂解了做PCR，更何况容易裂解的。
Triton X-100破膜加蛋白酶裂解这个想法是可以的，只是Triton X-100的添加量要自己试一下，而且蛋白酶 ...

亲，你们提取肉类的DNA有啥快速方法没？
赞一下 回复此楼
6楼2014-09-29 15:59:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
液氮研磨然后提取既可以了。

倒是必须加蛋白酶裂解。
赞一下 回复此楼
天行健
7楼2014-09-29 16:04:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

koujie1986

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by a599209150 at 2014-09-29 15:59:35
亲，你们提取肉类的DNA有啥快速方法没？...

都是用foregene、天根这些国产试剂盒提的。一方面试剂盒里面的成分都比较成熟，不需要自己去调整；另一方面提取时间都差不多，一两个小时就整完了
赞一下 回复此楼
8楼2014-09-29 16:13:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 a599209150 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 wsYGJnURYvm6 2026-08-31 3/150 2026-09-01 01:40 by o3EMxHUAQDtS
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 4/200 2026-09-01 01:30 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭