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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于克隆载体的选择
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zeroon

木虫 (正式写手)

[求助] 关于克隆载体的选择 已有7人参与

大家好，在下有个关于载体选择的问题。是这样的，我自己构建了一个大约6kb长的片段，这个片段上含有某菌一个基因的上下游同源臂和抗性基因标记，主要作用是用来敲除该目的基因的。
现在呢，我想把这个片段连接在载体上，放在大肠杆菌中扩增。我看了一些商用的克隆载体，基本上都是2kb大。那么我这个6kb 大的片段能连到2kb大的载体上吗？

第二个问题是，商用的载体种类也挺多，什么样的载体适合呢？

谢谢了！
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1楼 2014-09-26 11:18:42
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yunshenglmm

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zeroon: 金币+1, ★有帮助 2014-09-29 17:26:15
直接PCR产物双酶切，连到表达载体上，更省时间！
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6楼2014-09-26 18:02:45
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-26 16:46:09
zeroon: 金币+1, ★有帮助 2014-09-26 16:47:27
6k的序列肯定是可以连到2k的克隆载体上的，我曾经做过8k的，只不过连接效率较一般小片段要低，现在有很多公司有专门连大片段的克隆载体，多问问。
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2楼2014-09-26 15:03:23
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bwangel

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
能连，6K不算特别大
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3楼2014-09-26 15:14:20
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我非子

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没事的！加油加油加油加油加油加油加油！力挺！
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学以致用
4楼2014-09-26 15:37:20
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