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zeroon

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[求助] 关于克隆载体的选择已有7人参与

大家好，在下有个关于载体选择的问题。是这样的，我自己构建了一个大约6kb长的片段，这个片段上含有某菌一个基因的上下游同源臂和抗性基因标记，主要作用是用来敲除该目的基因的。
现在呢，我想把这个片段连接在载体上，放在大肠杆菌中扩增。我看了一些商用的克隆载体，基本上都是2kb大。那么我这个6kb 大的片段能连到2kb大的载体上吗？

第二个问题是，商用的载体种类也挺多，什么样的载体适合呢？

谢谢了！

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1楼 2014-09-26 11:18:42

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stone2239

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zeroon: 金币+1, ★有帮助 2014-09-26 16:47:27

6k的序列肯定是可以连到2k的克隆载体上的，我曾经做过8k的，只不过连接效率较一般小片段要低，现在有很多公司有专门连大片段的克隆载体，多问问。

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2楼2014-09-26 15:03:23

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bwangel

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感谢参与，应助指数 +1

能连，6K不算特别大

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3楼2014-09-26 15:14:20

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没事的！加油加油加油加油加油加油加油！力挺！

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学以致用

4楼2014-09-26 15:37:20

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zeroon: 金币+1, ★有帮助 2014-09-29 17:26:35

你要的不是表达载体所以你主要看你需要的酶切点载体里面包括了就行，
非表达载体比较便宜，你问问周围实验室的兴许就能要点

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5楼2014-09-26 16:36:32

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yunshenglmm

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zeroon: 金币+1, ★有帮助 2014-09-29 17:26:15

直接PCR产物双酶切，连到表达载体上，更省时间！

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6楼2014-09-26 18:02:45

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jian212

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zeroon: 金币+2, ★有帮助 2014-09-29 17:26:03

常见的克隆载体PUC 系列和PBSK 系列都行

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学习再学习，努力再努力。

7楼2014-09-29 15:50:16

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zeroon: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-04-28 14:30:05

常见的商用克隆载体可以查看Takara的商品目录，种类挺多的。国产的现在也有，TranS系列的。

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8楼2015-04-28 14:29:04

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