版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

返回列表

金晓柒

木虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 3191.6
帖子: 23
在线: 22.3小时
虫号: 2150810
注册: 2012-11-27
专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 小球藻PCR相关问题，急求助！！已有1人参与

各位大神，我最近想做小球藻里面某一基因的荧光定量，在利用引物进行退火温度摸索时，什么都P不出来，2个多月了，引物也换过，大家有做藻的吗，做的时候有什么需要注意的吗，比如退火温度之类的，请各位大神帮忙，我是新接触这个，确实很迷茫，急死了，这里先谢过各位了。

回复此楼

» 猜你喜欢

生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项已经有0人回复
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有85人回复
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点已经有0人回复
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征已经有0人回复
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗已经有25人回复
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈已经有0人回复
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点已经有0人回复
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核已经有0人回复
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序已经有0人回复
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

新手求助关于逆转录PCR问题已经有9人回复
求助！新人，融合PCR一直融不上！！！已经有24人回复
求助PCR结果分析~~~ 已经有8人回复
求助师兄师姐~有关于巢式PCR的问题~~help 已经有11人回复
紧急求助！我的RT-PCR数据怎么做成可以发文章的图？已经有26人回复
求助，关于pcr扩增后产物序列在ncbi上的比对，以及3' race接头引物的设计。。已经有6人回复
RT-PCR结果分析求助已经有5人回复
着急！RT-PCR扩增效率低，情况很诡异，求助高手帮忙指点已经有12人回复
求助！关于RT-PCR的问题！已经有20人回复
向RTPCR高手求助，关于RTPCR的空白对照问题已经有9人回复
【求助/交流】PCR Mix如何选择？急~~ 已经有4人回复
【求助/交流】减少PCR错配已经有12人回复
【求助/交流】PCR反应体系的配制已经有11人回复
【求助/交流】PCR产物电泳检测已经有20人回复
【求助/交流】请教个关于inverse PCR的问题已经有21人回复
【求助/交流】关于降落pcr的问题！已经有4人回复
【求助/交流】PCR 聚合酶链反应是用来干嘛的已经有20人回复
【求助/交流】PCR延伸问题已经有12人回复
【求助/交流】求助PCR杂带过多！已经有8人回复
【求助/交流】定点突变PCR后加DPN1酶的作用已经有4人回复
【求助/交流】pcr中模板量的问题已经有11人回复

1楼 2014-09-22 09:29:56

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

说腻早安

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 40
帖子: 22
在线: 34.7小时
虫号: 2812109
注册: 2013-11-19
性别: GG
专业: 微生物遗传学

【答案】应助回帖

首先，建议提取藻的DNA来做PCR或者用TE在100°C煮10min然后用上清来PCR。
其次，初始的变性时间稍微延长一点，10min左右，退火温度的话，你还是用梯度摸索一下。
最后，延伸时间2min，30个循环左右。

赞一下