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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 最近蛋白诱导表达遇到了瓶颈
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紫夜微蓝

新虫 (初入文坛)

[求助] 最近蛋白诱导表达遇到了瓶颈 已有5人参与

本人新手，第一次做蛋白的诱导表达，不知为何始终表达不出。。用的载体是pET32a，BL21（BE3）宿主菌，IPTG 0.1-1mM梯度诱导，试过了37度4h、20度、25度过夜，但始终未见明显条带。。现在无从下手了

恳请论坛的各位高手们给予宝贵的意见，小女子感激不尽
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1楼 2014-09-04 15:04:39
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

可能是蛋白有毒性，或者蛋白分子量大。小蛋白表达量高。
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10楼2014-09-09 12:29:38
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
30度12小时尝试过没有？
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2楼2014-09-04 16:24:59
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紫夜微蓝

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-09-04 16:24:59
30度12小时尝试过没有？

没有，但28度8小时尝试过诶，是不是时间太短呢
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3楼2014-09-04 16:28:05
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留小保

铁虫 (小有名气)
之前测序什么的全没有问题吗？
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人生若只如初见 何事秋风悲画扇
4楼2014-09-04 17:37:09
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