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最近蛋白诱导表达遇到了瓶颈
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紫夜微蓝
新虫
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最近蛋白诱导表达遇到了瓶颈
已有5人参与
本人新手,第一次做蛋白的诱导表达,不知为何始终表达不出。。用的载体是pET32a,BL21(BE3)宿主菌,IPTG 0.1-1mM梯度诱导,试过了37度4h、20度、25度过夜,但始终未见明显条带。。现在无从下手了
恳请论坛的各位高手们给予宝贵的意见,小女子感激不尽
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蛋白诱导
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1楼
2014-09-04 15:04:39
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jurkat.1640
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专业: 病毒学
【答案】应助回帖
可能是蛋白有毒性,或者蛋白分子量大。小蛋白表达量高。
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10楼
2014-09-09 12:29:38
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wolfman840
木虫
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专业: 生物技术药物
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
30度12小时尝试过没有?
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2楼
2014-09-04 16:24:59
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紫夜微蓝
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2楼
:
Originally posted by
wolfman840
at 2014-09-04 16:24:59
30度12小时尝试过没有?
没有,但28度8小时尝试过诶,是不是时间太短呢
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3楼
2014-09-04 16:28:05
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铁虫
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注册: 2012-03-29
性别:
MM
专业: 蛋白质组学
之前测序什么的全没有问题吗?
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人生若只如初见 何事秋风悲画扇
4楼
2014-09-04 17:37:09
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