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Tina爱睡觉

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 5
帖子: 5
在线: 4.7小时
虫号: 2716167
注册: 2013-10-11
性别: MM
专业: 蔬菜学与瓜果学

[求助] 扩增不出目的条带已有3人参与

本人新手，RNA反转录成cDNA，并以cDNA为模板进行目的基扩增，大约1200bp。已经用内参引物检测了cDNA没问题，也做了48-60℃的温度梯度，但是始终没有扩增出目的条带。用的酶是primer star，体系为模板1，引物1，buffer5，dntp2，水15，酶1，程序为95℃ 1min，95℃ 30sec，55℃ 30sec，68℃ 2min，68℃ 5min，循环数35。求高人指点

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优越感，不安全感，自控力

1楼 2014-09-02 19:25:56

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

专家经验: +24
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应助: 599 (博士)
贵宾: 2.689
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散金: 1088
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虫号: 849017
注册: 2009-09-16
性别: GG
专业: 细胞信号转导
管辖: 分子生物

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-10 09:02:40

可以尝试加大模板的量的到5ul再扩增试试

学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com

5楼2014-09-03 18:18:05

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