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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 用来酶切的质粒要求
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三蛰

铜虫 (小有名气)

[求助] 用来酶切的质粒要求 已有3人参与

之前没有想到这个问题，最近看到一些帖子才突然有这方面的疑问，希望大家不吝赐教。
就是用来做酶切线性化的质粒，在提取后跑电泳，必须要二/三条带吗？
如果质粒是一条带，那么说明所得的质粒大都为线性化的质粒，无法再用正确的限制性内切酶来酶切进行转化。
是不是这样呢？
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我不会！
1楼 2014-09-02 15:08:48
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miaoshuang

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-02 20:19:57
不一定，我一条带也切过，没问题的
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努力，勇敢向前走，一切皆有可能
2楼2014-09-02 17:29:19
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huyan0817

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
三蛰(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-09-02 20:20:02
没有懂楼主的意思,不过酶切未必会是2条或3条带,如果是单酶切而且质粒上面只有一个相应的酶切未点,那么电泳结果是一条带,如果有2个酶切位点,也不一定会显示出2个条带,要看酶切片段大小!
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3楼2014-09-02 17:30:44
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hongqifei

木虫 (小有名气)
环形质粒电泳也不一定就是2~3条带，有时候也可能一大团的样子（看起来像一条带，但是和酶切线性化的条带完全不同），这个和质粒所处的溶液有关吧。只要酶切后条带单一、大小正确，我觉得完全没有问题。
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何须剑道争锋？千人指，万人封，可问江湖鼎峰，三尺秋水尘不染，天下无双。
4楼2014-09-02 22:53:49
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xipha

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
三蛰: 金币+7 2014-09-03 15:00:09
这个不要紧的, 该切切. 回头连接的时候,T4就直接顺便连回去了.
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5楼2014-09-03 00:01:32
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