| 查看: 1761 | 回复: 13 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
hj890509金虫 (正式写手)
|
[求助]
连接转化问题 已有6人参与
|
||
| 表达载体连接片段转化后不长菌落，转质粒验证过感受态细胞没有问题，配置的平板也没有问题，表达载体用AvrII和SnaBI双酶切，一个是粘性末端，另一个是平末端，目的片段是用相同的酶从T载体上切下来回收的，载体9.3kb，目的片段4.4kb，摩尔比为1:3,1:5,1:8都做过，用NEB的T4连接酶22度连接2h后转化的，也做过其他时间，求各位虫友们帮忙分析分析，谢啦 |
回复此楼» 猜你喜欢
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有200人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有17人回复
-
散金
已经有57人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- T载体连接问题
已经有4人回复
- 本人目前遇到连接问题
已经有17人回复
- 做连接转化时遇到了问题，请教除了具体操作步骤，还需要详细注意什么细节？
已经有13人回复
- 连接转化假阳性提不出来质粒吗？
已经有8人回复
- 急求:PCR 产物连接转化 涂板后就是不长 到底是怎么回事啊
已经有5人回复
- 酶切、连接和转化
已经有9人回复
- 连接转化不长菌是怎么回事？？？
已经有15人回复
- 基因与载体连接转化后涂版长出了菌，提质粒却没有提出来，不知道什么原因？？
已经有17人回复
- 单酶切的大片段连接转化及多个片段的连接转化问题
已经有8人回复
- 目的基因的连接与转化
已经有3人回复
- 长片段连接问题
已经有12人回复
- 大片段连接问题
已经有20人回复
- 为什么最近做连接转化总是失败
已经有20人回复
- 大肠杆菌转化问题
已经有5人回复
- 连接与转化问题
已经有5人回复
- 连接转化不成功问题
已经有17人回复
- 连接转化进大肠杆菌BL21
已经有6人回复
- 目的基因连接pGEX-6p-1进行转化的问题
已经有14人回复
- 连接体系的确定
已经有19人回复
- 胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题
已经有8人回复
- 克隆基因和载体连接后转化至大肠杆菌，为什么每次涂板都是空平板没有菌落？
已经有17人回复
- 【求助/交流】酶连转化
已经有24人回复
- 【求助/交流】转化后涂板问题
已经有10人回复
111111111118
银虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 138.4
- 散金: 79
- 红花: 10
- 帖子: 348
- 在线: 74.5小时
- 虫号: 1960805
- 注册: 2012-08-28
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hj890509: 金币+5, ★有帮助 2014-09-11 14:58:38
感谢参与，应助指数 +1
hj890509: 金币+5, ★有帮助 2014-09-11 14:58:38
|
对于涉及到平末端的克隆， 建议你看看另一个帖子和相关论文： http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7727916 应该还是很有帮助的， 毕竟平末端克隆的难度大一些， 得需要点特殊处理， 希望能有帮助！ |
3楼2014-09-02 16:18:50
2楼2014-09-02 14:50:24
huyan0817
木虫 (正式写手)
- 应助: 55 (初中生)
- 金币: 3604.8
- 红花: 3
- 帖子: 344
- 在线: 119.7小时
- 虫号: 1232425
- 注册: 2011-03-14
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2014-09-02 17:22:34
hj890509
金虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 1193.6
- 散金: 77
- 沙发: 1
- 帖子: 323
- 在线: 215小时
- 虫号: 2015316
- 注册: 2012-09-20
- 性别: MM
- 专业: 蛋白质组学
5楼2014-09-03 09:43:43
40