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wangyahui123

新虫 (初入文坛)

[求助] 提RNA有DNA污染 已有1人参与

我提的RNA有DNA污染,怎么避免呢
28S上有一条亮亮的细细的带,大家帮忙看一下吧

提RNA有DNA污染
2014083003.JPG
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shuangyin

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-02 20:22:23
wangyahui123: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-02 22:11:19
是Trizol法提的吧,最主要就是吸上清的时候不要贪多,一般没问题的。另外就是提取完RNA后再用DNase I处理
2楼2014-09-02 09:17:47
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)

DNase I处理
3楼2014-09-02 11:50:44
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wangyahui123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shuangyin at 2014-09-02 09:17:47
是Trizol法提的吧,最主要就是吸上清的时候不要贪多,一般没问题的。另外就是提取完RNA后再用DNase I处理

用DNA酶处理会不会损失大量RNA呢?我的RNA量不多
4楼2014-09-02 22:10:26
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wangyahui123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shuangyin at 2014-09-02 09:17:47
是Trizol法提的吧,最主要就是吸上清的时候不要贪多,一般没问题的。另外就是提取完RNA后再用DNase I处理

今天用的TAKARA的Trizol提的,吸的挺少的,但还是稍微有一点,你帮我看一下我提的那两条带是28S和18S吗?看见上面还隐约有带,第8孔那应该是DNA污染吧?
提RNA有DNA污染-1
2014090201.JPG

5楼2014-09-02 22:18:34
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shuangyin

新虫 (正式写手)

是的,完整性还可以。用DNase I处理肯定会损失一部分的,但如果你要做realtime的话基本上是必须做的
6楼2014-09-03 10:25:20
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wangyahui123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by shuangyin at 2014-09-03 10:25:20
是的,完整性还可以。用DNase I处理肯定会损失一部分的,但如果你要做realtime的话基本上是必须做的

恩,知道了,谢谢
7楼2014-09-04 22:35:38
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by shuangyin at 2014-09-03 10:25:20
是的,完整性还可以。用DNase I处理肯定会损失一部分的,但如果你要做realtime的话基本上是必须做的

DNase处理,RNA为什么会损失啊。。。。是指最后80°灭活么?我咋做出来没啥损失过捏。。。
8楼2014-09-05 09:08:52
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fuchange918

木虫 (正式写手)

楼主能否把你的提取步骤分享一下啊?
9楼2014-09-05 10:49:29
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