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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 提RNA有DNA污染
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wangyahui123

新虫 (初入文坛)

[求助] 提RNA有DNA污染 已有1人参与

我提的RNA有DNA污染，怎么避免呢
28S上有一条亮亮的细细的带，大家帮忙看一下吧

提RNA有DNA污染
2014083003.JPG
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1楼 2014-09-01 23:00:10
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shuangyin

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-02 20:22:23
wangyahui123: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-02 22:11:19
是Trizol法提的吧，最主要就是吸上清的时候不要贪多，一般没问题的。另外就是提取完RNA后再用DNase I处理
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2楼2014-09-02 09:17:47
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)
DNase I处理
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3楼2014-09-02 11:50:44
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wangyahui123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shuangyin at 2014-09-02 09:17:47
是Trizol法提的吧，最主要就是吸上清的时候不要贪多，一般没问题的。另外就是提取完RNA后再用DNase I处理

用DNA酶处理会不会损失大量RNA呢？我的RNA量不多
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4楼2014-09-02 22:10:26
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wangyahui123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shuangyin at 2014-09-02 09:17:47
是Trizol法提的吧，最主要就是吸上清的时候不要贪多，一般没问题的。另外就是提取完RNA后再用DNase I处理

今天用的TAKARA的Trizol提的，吸的挺少的，但还是稍微有一点，你帮我看一下我提的那两条带是28S和18S吗？看见上面还隐约有带，第8孔那应该是DNA污染吧？
提RNA有DNA污染-1
2014090201.JPG
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5楼2014-09-02 22:18:34
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shuangyin

新虫 (正式写手)
是的，完整性还可以。用DNase I处理肯定会损失一部分的，但如果你要做realtime的话基本上是必须做的
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6楼2014-09-03 10:25:20
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wangyahui123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by shuangyin at 2014-09-03 10:25:20
是的，完整性还可以。用DNase I处理肯定会损失一部分的，但如果你要做realtime的话基本上是必须做的

恩，知道了，谢谢
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7楼2014-09-04 22:35:38
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by shuangyin at 2014-09-03 10:25:20
是的，完整性还可以。用DNase I处理肯定会损失一部分的，但如果你要做realtime的话基本上是必须做的

DNase处理，RNA为什么会损失啊。。。。是指最后80°灭活么？我咋做出来没啥损失过捏。。。
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8楼2014-09-05 09:08:52
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fuchange918

木虫 (正式写手)
楼主能否把你的提取步骤分享一下啊？
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9楼2014-09-05 10:49:29
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