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zengsihai

木虫 (小有名气)

iloveemuch

[求助] 荧光定量PCR仪在物种鉴定中的作用 已有1人参与

各位虫友:
      小弟一只初涉分子生物学的菜鸟。现在在口岸从事植物检疫工作,实验室以前使用普通PCR仪做真菌的分子鉴定,现在实验室进了一台荧光定量PCR仪,领导说,不管杀鸡用牛刀,还是大炮轰蚊子,涉设法将荧光定量PCR仪用起来。我目前专注于进口美洲大豆的检疫性真菌病害的研究,关注的是我国官方植物检疫名录上的检疫性真菌。想请问高手的是:
    1、荧光定量PCR仪如何在真菌鉴定中发挥作用,在物种鉴定中,荧光定量PCR仪能够做什么事?
    2、我看了一些我们系统的期刊《植物检疫》里面的一些文章,那都不过是研究的性质,仪器的使用是为了发文章所用;使用荧光定量真是仅为发文章或者探索反应条件之类的试剂盒研发所用吗?
   3、之前,我鉴定真菌,都是走:症状确定,病原菌分离,纯化,摇菌培养,提取DNA,普通梯度PCR,电泳,送测序,BLASTN比对的过程,使用普通PCR也顺手,现在又有了荧光定量PCR仪,我能够用它做什么事情?      4、我实验室在这台荧光定量PCR仪是伯乐,bio-bad(CFX-96)的,39.38W买的,性能如何?差不多价格的同类仪器,如ABI,罗氏,耶拿的相比,孰好孰差?
    人家是没有仪器发愁,我相反,是有了仪器犯愁(有锅没米)。
    虫友,您能给我提一提建议吗?
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zengsihai
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

PCR实验主要采用SYBR Green染料法和Taqman探针法,我们使用的BIOGHSC Super Probe One Step Kit的检测灵敏度度达到了1pg总RNA,具有很高的检测灵敏度。各反应成分以 Mix的形式提供,对于我们实验者来说非常方便。
2楼2019-06-28 13:51:50
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