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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 蛋白双向电泳问题咨询
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shen_41745

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白双向电泳问题咨询 已有2人参与

我跑的蛋白双向电泳蛋白点总是那么少，而且横向拖尾一直解决不了，哪位大神给点意见啊？

蛋白双向电泳问题咨询
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1楼 2014-08-25 09:43:22
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王平阳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
shen_41745(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-25 22:41:45
横向拖尾应该是第一向等电聚焦出了问题，一般跑出来的蛋白点是圆的才正常。
你可以从以下几个方面检查：
1、第一向8000V或者10000V的电压有没有升上去，如果没有，横向会出现拖尾或者聚在一起分不开；
2、检查水化液试剂是否失效，其中Destreak Reagent就是专门用来消除拖尾的；
3、IPG Buffer切记加多，否则影响结果；
4、第一向上等电聚焦仪的时候检查胶槽电极是否与电极板贴合紧密，之间是否有杂物（灰尘、水汽）

以上个人见解，仅供参考
赞一下 回复此楼
没有做不到，只有想不到！
2楼2014-08-25 22:13:24
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笨蛋娃娃5121

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我的蛋白点也一直很少，不知道是什么情况，不知道楼主的问题解决了么
赞一下 回复此楼
3楼2014-10-08 15:12:09
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