应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 请教各位师兄师姐，蛋白电泳出问题了
81/1返回列表
查看: 1795  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wzp9012

铁虫 (著名写手)

[求助] 请教各位师兄师姐，蛋白电泳出问题了 已有3人参与

小弟最近在纯化蛋白，并用SDS-PAGE电泳检测。先前跑的电泳还算正常，条带都是从分离胶交界处那开始分离，但最近几次跑的电泳都莫名其妙的到中间才开始分离，而且感觉不少蛋白都沉积在一起，跑最下面去了分不开。请教各位师兄师姐，有没有出现过类似的情况，这是什么地方出问题了还望告知小弟。

请教各位师兄师姐，蛋白电泳出问题了
20140527205706.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-18 08:25:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zero19871029

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wzp9012(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-18 15:45:32
跑胶时电压的情况是怎么样的，跑浓缩胶的时候电压可以适当调低一点，等到marker差不多能够分清楚时（我们用的是thermo的预染marker，能够看到红色条带时就算分开了）就可以加电压了，这样跑出来的条带比较好看。
另外就是你的分离胶的问题，是不是pH或者浓度跟之前不太一样，此外分离不同大小的蛋白时用的浓度也是不一样的
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-18 11:34:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clj881128

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wzp9012(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-18 15:45:47
这要看你蛋白的大小和所用胶的浓度了，建议胶浓度增大一些。
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-18 15:36:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzp9012

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by clj881128 at 2014-08-18 15:36:21
这要看你蛋白的大小和所用胶的浓度了，建议胶浓度增大一些。

我用的是10%分离胶，5%的浓缩胶，目的蛋白理论上在43Kda左右
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-21 15:44:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzp9012

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zero19871029 at 2014-08-18 11:34:44
跑胶时电压的情况是怎么样的，跑浓缩胶的时候电压可以适当调低一点，等到marker差不多能够分清楚时（我们用的是thermo的预染marker，能够看到红色条带时就算分开了）就可以加电压了，这样跑出来的条带比较好看。
另 ...

电压先前用150v跑过正常的，这回用的130v
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-21 15:51:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clj881128

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by wzp9012 at 2014-08-21 15:44:25
我用的是10%分离胶，5%的浓缩胶，目的蛋白理论上在43Kda左右...

一直都是用这一个浓度吗？有没有做过对比试验？样品和以前的一样？胶配得有没有问题？
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-28 13:20:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

令狐少陈

铜虫 (小有名气)
你是不是做胶的时候加反了，先加分离胶，再加浓缩胶。如果marker都这样肯定是你的问题。或者电压我们一般80V30min 120V1h 你呢
赞一下 回复此楼
多多交流，海纳百川
7楼2014-08-28 13:44:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

帖航

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wzp9012(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-28 21:57:57
应该是胶浓度低，电压影响不大，我们都是200V恒压的，以前伯乐的技术说他们用300V电压跑，我也看过他们的胶，效果也挺好的。
赞一下 回复此楼
8楼2014-08-28 14:08:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wzp9012 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 23/1150 2026-11-07 06:49 by Equinoxhua
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 16:34 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭