应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 请教各位师兄师姐，蛋白电泳出问题了
81/1返回列表
查看: 1679  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wzp9012

铁虫 (著名写手)

[求助] 请教各位师兄师姐，蛋白电泳出问题了 已有3人参与

小弟最近在纯化蛋白，并用SDS-PAGE电泳检测。先前跑的电泳还算正常，条带都是从分离胶交界处那开始分离，但最近几次跑的电泳都莫名其妙的到中间才开始分离，而且感觉不少蛋白都沉积在一起，跑最下面去了分不开。请教各位师兄师姐，有没有出现过类似的情况，这是什么地方出问题了还望告知小弟。

请教各位师兄师姐，蛋白电泳出问题了
20140527205706.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-18 08:25:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zero19871029

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wzp9012(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-18 15:45:32
跑胶时电压的情况是怎么样的，跑浓缩胶的时候电压可以适当调低一点，等到marker差不多能够分清楚时（我们用的是thermo的预染marker，能够看到红色条带时就算分开了）就可以加电压了，这样跑出来的条带比较好看。
另外就是你的分离胶的问题，是不是pH或者浓度跟之前不太一样，此外分离不同大小的蛋白时用的浓度也是不一样的
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-18 11:34:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clj881128

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wzp9012(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-18 15:45:47
这要看你蛋白的大小和所用胶的浓度了，建议胶浓度增大一些。
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-18 15:36:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzp9012

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by clj881128 at 2014-08-18 15:36:21
这要看你蛋白的大小和所用胶的浓度了，建议胶浓度增大一些。

我用的是10%分离胶，5%的浓缩胶，目的蛋白理论上在43Kda左右
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-21 15:44:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzp9012

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zero19871029 at 2014-08-18 11:34:44
跑胶时电压的情况是怎么样的，跑浓缩胶的时候电压可以适当调低一点，等到marker差不多能够分清楚时（我们用的是thermo的预染marker，能够看到红色条带时就算分开了）就可以加电压了，这样跑出来的条带比较好看。
另 ...

电压先前用150v跑过正常的，这回用的130v
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-21 15:51:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clj881128

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by wzp9012 at 2014-08-21 15:44:25
我用的是10%分离胶，5%的浓缩胶，目的蛋白理论上在43Kda左右...

一直都是用这一个浓度吗？有没有做过对比试验？样品和以前的一样？胶配得有没有问题？
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-28 13:20:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

令狐少陈

铜虫 (小有名气)
你是不是做胶的时候加反了，先加分离胶，再加浓缩胶。如果marker都这样肯定是你的问题。或者电压我们一般80V30min 120V1h 你呢
赞一下 回复此楼
多多交流，海纳百川
7楼2014-08-28 13:44:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

帖航

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wzp9012(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-28 21:57:57
应该是胶浓度低，电压影响不大，我们都是200V恒压的，以前伯乐的技术说他们用300V电压跑，我也看过他们的胶，效果也挺好的。
赞一下 回复此楼
8楼2014-08-28 14:08:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wzp9012 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +30 医学老男孩 2026-08-13 65/3250 2026-08-15 22:31 by zxy7909
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +8 majunge000 2026-08-11 10/500 2026-08-15 18:55 by Equinoxhua
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +7 Ldrop2023 2026-08-13 7/350 2026-08-15 15:57 by mzhh2000
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭