24小时热门版块排行榜    

查看: 1452  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wzp9012

铁虫 (著名写手)

[求助] 请教各位师兄师姐,蛋白电泳出问题了 已有3人参与

小弟最近在纯化蛋白,并用SDS-PAGE电泳检测。先前跑的电泳还算正常,条带都是从分离胶交界处那开始分离,但最近几次跑的电泳都莫名其妙的到中间才开始分离,而且感觉不少蛋白都沉积在一起,跑最下面去了分不开。请教各位师兄师姐,有没有出现过类似的情况,这是什么地方出问题了还望告知小弟。

请教各位师兄师姐,蛋白电泳出问题了
20140527205706.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

令狐少陈

铜虫 (小有名气)

你是不是做胶的时候加反了,先加分离胶,再加浓缩胶。如果marker都这样肯定是你的问题。或者电压我们一般80V30min 120V1h 你呢
多多交流,海纳百川
7楼2014-08-28 13:44:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

zero19871029

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wzp9012(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-18 15:45:32
跑胶时电压的情况是怎么样的,跑浓缩胶的时候电压可以适当调低一点,等到marker差不多能够分清楚时(我们用的是thermo的预染marker,能够看到红色条带时就算分开了)就可以加电压了,这样跑出来的条带比较好看。
另外就是你的分离胶的问题,是不是pH或者浓度跟之前不太一样,此外分离不同大小的蛋白时用的浓度也是不一样的
2楼2014-08-18 11:34:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clj881128

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wzp9012(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-18 15:45:47
这要看你蛋白的大小和所用胶的浓度了,建议胶浓度增大一些。
3楼2014-08-18 15:36:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzp9012

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by clj881128 at 2014-08-18 15:36:21
这要看你蛋白的大小和所用胶的浓度了,建议胶浓度增大一些。

我用的是10%分离胶,5%的浓缩胶,目的蛋白理论上在43Kda左右
4楼2014-08-21 15:44:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 266求调剂 +3 阳阳哇塞 2026-03-14 7/350 2026-03-18 09:42 by wangkm
[教师之家] 焦虑 +8 水冰月月野兔 2026-03-13 10/500 2026-03-18 09:21 by 咪呜喵呜
[考研] 278求调剂 +5 烟火先于春 2026-03-17 5/250 2026-03-18 08:43 by 星空星月
[考研] 【0856】化学工程(085602)313 分,本科学科评估A类院校化学工程与工艺,诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 8/400 2026-03-17 16:57 by ruiyingmiao
[考研] 274求调剂0856材料化工 +13 z2839474511 2026-03-11 14/700 2026-03-17 16:51 by share_joy
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +5 Liwangman 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:10 by 我的船我的海
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +5 d如愿上岸 2026-03-12 8/400 2026-03-16 15:19 by peike
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 一志愿211化学学硕310分求调剂 +8 努力奋斗112 2026-03-12 9/450 2026-03-13 15:41 by JourneyLucky
[考研] 土木第一志愿276求调剂,科研和技能十分丰富,求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 321求调剂(食品/专硕) +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
信息提示
请填处理意见