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alcyonezhang

铜虫 (小有名气)

[求助] 梯度空白杂峰什么原因 已有7人参与

大家好,新手,最近做个液相方法,流动相a为 水:TFA=100:0.5,流动相b  ACN:水=90:10 用TFA调节pH与a相同
时间程序     时间(min)    b相(%)
                     0                       10
                     4                       60
                     12                     60
                     15                     90
                     25                     90
                     28                     10
                     35                    stop      
图谱见附件

前面有个两个倒峰,后面有机相浓度上去后出很多杂峰,这样做最终方法肯定是不行的吧,如何解决呢?
流动相每天用之前都过滤脱气了

梯度空白杂峰什么原因
空白.jpg
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
TFA太高了,降低到0.1%试试,TFA本身吸收在低波长有吸收,你的检测波长是多少,如果在其他波长有吸收,就不要选低波长。梯度跨度也很大,确定起始有没有必要那么低?最终要不要那么高?色谱系统和柱子也可以考虑清洗一下,排除干扰。
快乐不需要走遍天涯去寻找,只需播一粒种子在脚下。
9楼2014-08-22 09:22:49
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查看全部 19 个回答

赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

总感觉你这个流动相中TFA比例过高~~~方法确定没问题么?
铁甲依然在
2楼2014-08-21 16:21:01
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
2.5Min前的峰感觉像溶剂峰,后面怎么觉得是你柱子不干净呢……30min基线忽然下来了是换梯度造成的,这些应该没什么影响,但是其他明显出峰的位置你好好排查下原因吧,我总觉得是系统或色谱柱不干净造成的……
3楼2014-08-21 19:30:17
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alcyonezhang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 赈早见琥珀主 at 2014-08-21 16:21:01
总感觉你这个流动相中TFA比例过高~~~方法确定没问题么?

方法不确定,是新方法开发,TFA比例过高会有什么影响呢?
4楼2014-08-22 09:07:30
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