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匿名

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1楼2014-08-20 15:45:50

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凌波丽

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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-21 17:59:59

蛋白质的四聚体的形成不一定非要形成二硫键！有些蛋白质的四聚体就是靠非共价的次级键结合到一起的，最明显的是血红蛋白！2楼居然说四聚体形成一般是形成了二硫键是没有道理的！不知道阁下的生物化学课是不是及格了！？

有些蛋白质的多聚体，实际上是多个亚基就是靠非共价的次级键结合到一起的，有新的活性，比如G蛋白，有些蛋白质则是多个亚基组成完整的蛋白质才有生物活性，比如：核糖体。

蛋白质形成多聚体或者多个亚基装配成为完整的蛋白质，不是任何时候都是必然的过程，首先各个亚基自身序列和折叠状态都要正确，其次有一定的浓度要求和环境的离子强度要求和pH等要求。比如在体外装配核糖体和解离核糖体大小亚基时对镁离子浓度的不同的要求。

如果每个亚基的序列和折叠状态没有错误的话，要正常装配，一般可以参考该种蛋白质的最适合的生理条件和最大活性的条件进行配置缓冲溶液。对于不是膜蛋白的情况，一般蛋白质聚合和亚基装配成蛋白质，可以适当提高溶液的离子强度（可以分梯度），并且去除掉溶液中的表面活性剂和变性剂。对于膜蛋白质的装配则要要加入适当类型和浓度的脂类或者类似作用的温和的表面活性剂。

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10楼2014-08-21 12:39:46

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jpfwx

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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pingweihh(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-20 16:54:39
pingweihh: 金币+12, 5 2014-08-21 09:03:45

首先可以确定一点，相同单体构成的四聚体是因为产生了高级结构，一般是二硫键的形成，这样才会有生物活性。
不知道你的四聚体的高级结构是怎么样的。但是大肠杆菌表达的蛋白是不能自己进行后修饰的，也就是说不会将单体正确的组装成有活性的四聚体。你电泳跑出来的蛋白是不是单体的位置？
如果确定单体是正确的可溶表达，你可以试试进行体外复性，看看能不能形成有活性的四聚体。

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