应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 载体构建一支失败
51/1返回列表
查看: 1410  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

你太善良

新虫 (著名写手)

[求助] 载体构建一支失败 已有4人参与

最近构建一条基因的6个载体，已经构建好了5个，另外一个就是PBridge没有构建成功，完全什么都不会张，2个酶切位点隔了4个碱基，尝试了双酶切和分步酶切都不行。还有一个现象就是，PBridge这个载体接种的时候有时间会长而有时间不长，我觉得问题可能出在这里，请大家帮忙分析分析
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-13 14:53:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangnan1987

新虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-20 15:39:00
建议你用一个酶,国产的ClonExpressTMII(价格便宜一些),进口的gibson Assembly®Master Mix(效率高一些),说明书在网上能找到,只要质粒能被线性化,就一定能构建成功,这个酶非常好用.就是质粒不能被线性化,你也可以PCR把质粒扩增出来.
赞一下 回复此楼
9楼2014-08-14 21:42:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

zero19871029

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
能把具体情况说清楚点吗，比如空载体能不能切开
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-13 17:29:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peng1997

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-08-20 15:38:46
间隔近 双酶切的时候相互影响 分步的时候，后一个效率不高
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-14 00:53:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

你太善良

新虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zero19871029 at 2014-08-13 17:29:49
能把具体情况说清楚点吗，比如空载体能不能切开

单酶切都能切开啊。不能切开还做什么啊
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-14 08:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕318求调剂 +6 February_Feb 2026-03-01 6/300 2026-03-02 10:36 by 聪明的大松鼠
[考研] 284求调剂 +9 天下熯 2026-02-28 10/500 2026-03-02 10:29 by 公瑾逍遥
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:16 by 13853210211
[考研] 0854复试调剂 276 +4 wmm9 2026-03-01 6/300 2026-03-02 09:28 by 热情沙漠
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +3 Qwertyuop 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:18 by aaadim
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭