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你太善良

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[求助] 载体构建一支失败已有4人参与

最近构建一条基因的6个载体，已经构建好了5个，另外一个就是PBridge没有构建成功，完全什么都不会张，2个酶切位点隔了4个碱基，尝试了双酶切和分步酶切都不行。还有一个现象就是，PBridge这个载体接种的时候有时间会长而有时间不长，我觉得问题可能出在这里，请大家帮忙分析分析

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1楼 2014-08-13 14:53:56

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你太善良

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引用回帖:

2楼: Originally posted by zero19871029 at 2014-08-13 17:29:49
能把具体情况说清楚点吗，比如空载体能不能切开

单酶切都能切开啊。不能切开还做什么啊

5楼2014-08-14 08:03:48

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zero19871029

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能把具体情况说清楚点吗，比如空载体能不能切开

2楼2014-08-13 17:29:49

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peng1997

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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-08-20 15:38:46

间隔近双酶切的时候相互影响分步的时候，后一个效率不高

4楼2014-08-14 00:53:21

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建议将空载测序。或者换一个别人保存的质粒重新转化，抽提，酶切。我以前也遇到过这个问题，或许不是酶切的问题，是你质粒抽提的问题。

6楼2014-08-14 09:41:21

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