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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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你太善良

新虫 (著名写手)

[求助] 载体构建一支失败 已有4人参与

最近构建一条基因的6个载体,已经构建好了5个,另外一个就是PBridge没有构建成功,完全什么都不会张,2个酶切位点隔了4个碱基,尝试了双酶切和分步酶切都不行。还有一个现象就是,PBridge这个载体接种的时候有时间会长而有时间不长,我觉得问题可能出在这里,请大家帮忙分析分析
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peng1997

新虫 (小有名气)

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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-08-20 15:38:46
间隔近 双酶切的时候相互影响 分步的时候,后一个效率不高
4楼2014-08-14 00:53:21
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zero19871029

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
能把具体情况说清楚点吗,比如空载体能不能切开
2楼2014-08-13 17:29:49
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你太善良

新虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zero19871029 at 2014-08-13 17:29:49
能把具体情况说清楚点吗,比如空载体能不能切开

单酶切都能切开啊。不能切开还做什么啊
5楼2014-08-14 08:03:48
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飞奔的大象

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-08-14 11:06:24
建议将空载测序。或者换一个别人保存的质粒重新转化,抽提,酶切。我以前也遇到过这个问题,或许不是酶切的问题,是你质粒抽提的问题。
6楼2014-08-14 09:41:21
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