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做Western blot需要抗体,如何向公司定制~需要提供些什么材料~
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陈北
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[
求助
]
做Western blot需要抗体,如何向公司定制~需要提供些什么材料~
已有4人参与
求Western blot牛人指导:
我打算做Western blot用来检测某蛋白在枯草中的表达情况,所使用抗体是不是用多克隆抗体就可以了?
计划让公司来制备抗体,是不是只向公司提供抗原蛋白的序列就可以了?
另能推荐个好的抗体制备公司就更好了~
多谢!
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百鬼狰狞,上帝无言
1楼
2014-08-12 15:47:47
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danneil207
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【答案】应助回帖
前几天我看了公众号一篇文章,是抗体制备整个流程的,跟一般的文章不一样,包括免疫羊驼、建库、筛选噬菌体都介绍得很详细,按照文章里面介绍的方法免疫羊驼得到免疫库能达到8次方,可以筛到高特异性的序列,抗体亲和力能达到纳摩尔级,非常不错,那篇文章你可以看一下
http://www.ktsm-life.com/product-detail-476.html
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6楼
2019-08-21 16:49:26
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snoopytbw
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专业: 环境微生物学
管辖:
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
建议用单抗,但是价格会贵一点。我以前是让英俊给我造的多抗,但是效价不是很高,WB结果也不太好。关键你提供的蛋白抗原序列的选择很重要,尽量选择特性性高的片段。可以去BLAST一下看看分数。做单抗的话效果会好很多。
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2楼
2014-08-13 09:00:04
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ahhngwj
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注册: 2012-02-26
专业: 植物化学保护
【答案】应助回帖
我以前做过一个抗体,你只要跟他说是什么蛋白,蛋白序列全长给他就行了。再跟他说一下你实验需求。比如说这个蛋白哪一部分你需要。
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3楼
2014-08-18 17:29:14
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wyj393854600
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恩,可以通过序列,但是你要选择定制路线,是通过多肽还是蛋白方式来合成。
目前国内很多都是一些皮包公司,真正技术好的不多。
上次我一个中科院的朋友做过一个单抗,是上海友科做的,WB出来了。你可以联系一下
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4楼
2014-09-25 09:59:56
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