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蛋白质纯化活性问题
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| 目前纯化一重组蛋白,是以包涵体形式表达,菌体破碎清洗后收集包涵体,SDS-PAGE显示纯度在90%以上,用2M NaOH溶解,胶题金检测有活性,用8M尿素溶解上His柱,流穿和洗脱都没有活性。之后用8M尿素溶解后,稀释复性,溶液浑浊,离心有沉淀,但是上层溶液有目的条带,并且有活性,过柱会影响活性么?还是尿素会影响? |
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