应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助帮忙设计下引物
51/1返回列表
查看: 1611  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

childchou

银虫 (小有名气)

[求助] 求助帮忙设计下引物 已有5人参与

是一段莱茵衣藻Chlamydomonas reinhardtii的基因 这是CDS序列
ATGTCGGCGCTCGTGCTGAAGCCCTGCGCGGCCGTGTCTATTCGCGGCAGCTCCTGCAGGGCGCGGCAGGTCGCCCCCCGCGCTCCGCTCGCAGCCAGCACCGTGCGTGTAGCCCTTGCAACACTTGAGGCGCCCGCACGCCGCCTAGGCAACGTCGCTTGCGCGGCTGCCGCACCCGCTGCGGAGGCGCCTTTGAGTCATGTCCAGCAGGCGCTCGCCGAGCTTGCCAAGCCCAAGGACGACCCCACGCGCAAGCACGTCTGCGTGCAGGTGGCTCCGGCCGTTCGTGTCGCTATTGCCGAGACCCTGGGCCTGGCGCCGGGCGCCACCACCCCCAAGCAGCTGGCCGAGGGCCTCCGCCGCCTCGGCTTTGACGAGGTGTTTGACACGCTGTTTGGCGCCGACCTGACCATCATGGAGGAGGGCAGCGAGCTGCTGCACCGCCTCACCGAGCACCTGGAGGCCCACCCGCACTCCGACGAGCCGCTGCCCATGTTCACCAGCTGCTGCCCCGGCTGGATCGCTATGCTGGAGAAATCTTACCCGGACCTGATCCCCTACGTGAGCAGCTGCAAGAGCCCCCAGATGATGCTGGCGGCCATGGTCAAGTCCTACCTAGCGGAAAAGAAGGGCATCGCGCCAAAGGACATGGTCATGGTGTCCATCATGCCCTGCACGCGCAAGCAGTCGGAGGCTGACCGCGACTGGTTCTGTGTGGACGCCGACCCCACCCTGCGCCAGCTGGACCACGTCATCACCACCGTGGAGCTGGGCAACATCTTCAAGGAGCGCGGCATCAACCTGGCCGAGCTGCCCGAGGGCGAGTGGGACAATCCAATGGGCGTGGGCTCGGGCGCCGGCGTGCTGTTCGGCACCACCGGCGGTGTCATGGAGGCGGCGCTGCGCACGGCCTATGAGCTGTTCACGGGCACGCCGCTGCCGCGCCTGAGCCTGAGCGAGGTGCGCGGCATGGACGGCATCAAGGAGACCAACATCACCATGGTGCCCGCGCCCGGGTCCAAGTTTGAGGAGCTGCTGAAGCACCGCGCCGCCGCGCGCGCCGAGGCCGCCGCGCACGGCACCCCCGGGCCGCTGGCCTGGGACGGCGGCGCGGGCTTCACCAGCGAGGACGGCAGGGGCGGCATCACACTGCGCGTGGCCGTGGCCAACGGGCTGGGCAACGCCAAGAAGCTGATCACCAAGATGCAGGCCGGCGAGGCCAAGTACGACTTTGTGGAGATCATGGCCTGCCCCGCGGGCTGTGTGGGCGGCGGCGGCCAGCCCCGCTCCACCGACAAGGCCATCACGCAGAAGCGGCAGGCGGCGCTGTACAACCTGGACGAGAAGTCCACGCTGCGCCGCAGCCACGAGAACCCGTCCATCCGCGAGCTGTACGACACGTACCTCGGAGAGCCGCTGGGCCACAAGGCGCACGAGCTGCTGCACACCCACTACGTGGCCGGCGGCGTGGAGGAGAAGGACGAGAAGAAGTGA

我之前用primer5设计了这个引物
HydA1-F        ATGTCGGCGCTCGTGCTGAA     tm 67
HydA1-R        TCACTTCTTCTCGTCCTTCTCCTCC    tm 64
扩不出来，求大神帮忙设计下引物。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
boomshakalaka
1楼 2014-07-06 00:26:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lma223

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

Using 1-based sequence positions
OLIGO            start  len      tm     gc%  any_th  3'_th hairpin seq
LEFT PRIMER        547   20   58.97   60.00    0.00   0.00    0.00 GACCTGATCCCCTACGTGAG
RIGHT PRIMER       790   20   59.19   55.00    0.00   0.00    0.00 GCTCCTTGAAGATGTTGCCC
赞一下 回复此楼
知行合一，致良知！
7楼2014-07-09 15:20:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

marc0705

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-07-06 12:24:03
扩不出来不一定是引物设计的问题吧，也许PCR程序有问题

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-07-06 08:38:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永远一片天

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-08 14:59:52
设计的引物一般都可以扩的出来，首先你需要确定你选择的这段模板DNA序列是否正确，其次你需要确定PCR实验的模板，找PCR的原因~PCR中水很重要的，很容易忽视的问题！祝:成功！
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-07-06 12:58:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

childchou

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by marc0705 at 2014-07-06 08:38:38
扩不出来不一定是引物设计的问题吧，也许PCR程序有问题

额...跑过温度梯度的，程序应该不会有很大的问题吧
赞一下 回复此楼
boomshakalaka
4楼2014-07-08 10:58:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 085600材料与化工 +5 安全上岸！ 2026-03-16 5/250 2026-03-18 15:33 by cmz0325
[考研] 314求调剂 +8 无懈可击的巨人 2026-03-12 8/400 2026-03-18 14:50 by haxia
[考研] 0854可跨调剂，一作一项核心论文五项专利，省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 265求调剂 +3 梁梁校校 2026-03-17 3/150 2026-03-18 09:12 by zhukairuo
[考研] 268求调剂 +7 好运连绵不绝 2026-03-12 8/400 2026-03-17 20:28 by xilongliang
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +16 不知道叫什么！ 2026-03-15 18/900 2026-03-17 17:05 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +6 孔志浩 2026-03-12 11/550 2026-03-17 14:41 by 周舟舟77
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨； 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭