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xingyun789金虫 (小有名气)
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[求助]
有关原核表达载体构建方面的问题 已有1人参与
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| 我将我的目的片段用BamHI和NotI进行双酶切，pET32a载体也是用这两个酶进行双酶切，然后将我的目的片段同这个载体进行连接，将连接的产物转化BL21感受态，然后涂平板，平板上长出了单菌落，挑取单菌落进行培养，然而进行菌落PCR的时候，并没有出现相应的目的条带。我用的是T7通用引物以及特异引物进行的检测，其中，T7通用引物用的退火温度是58度。出现这样的原因，还望各位能给解答一下，谢谢。。。 |
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 核酸生物学实验经验 |
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xingyun789
金虫 (小有名气)
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3楼2014-07-03 10:09:18
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xingyun789: 金币+5 2014-07-03 10:09:25
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xingyun789: 金币+5 2014-07-03 10:09:25
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2楼2014-07-03 09:54:54
随风飘摇11
木虫 (著名写手)
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4楼2014-07-04 07:55:35
quiller2000
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5楼2014-07-04 08:54:17
