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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 原核表达载体构建
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Carnity

新虫 (正式写手)

[求助] 原核表达载体构建 已有2人参与

最近在构建载体是遇到一点迷惑，还请大家帮助：
1. 具有氨苄、氯霉素或者卡纳抗性的质粒，加入抗生素后，这些抗性基因是如何表达的？
2. 是不是有些启动子不用诱导剂诱导就能启动下游基因的表达？
3. lac I、lac Z之类的东西在载体中是干啥用的？
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1楼 2014-01-10 13:10:23
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zheng1991

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Carnity: 金币+4, ★★★很有帮助, 感谢帮助 2014-01-11 19:31:57
1. 本底表达的
2.没有乳糖操纵子就行
3.这是阻碍蛋白
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2楼2014-01-10 13:27:44
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Jianxiao_H

金虫 (正式写手)
你没学过分子生物学吧？
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多少辛酸不可告人。
3楼2014-01-10 13:57:08
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Carnity

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zheng1991 at 2014-01-10 13:27:44
1. 本底表达的
2.没有乳糖操纵子就行
3.这是阻碍蛋白

也就是说在一个载体中如果没有阻遏蛋白的出现，只要有启动子，核糖体结合位点，下游基因就能够表达，是吧。
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4楼2014-01-10 14:24:10
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Carnity

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Jianxiao_H at 2014-01-10 13:57:08
你没学过分子生物学吧？

当时没好好听讲，现在忘的差不多了
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5楼2014-01-10 14:27:05
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zheng1991

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Carnity at 2014-01-10 14:24:10
也就是说在一个载体中如果没有阻遏蛋白的出现，只要有启动子，核糖体结合位点，下游基因就能够表达，是吧。...

还要有复制子 抗性筛选基因
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6楼2014-01-11 16:59:27
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Carnity: 金币+1, ★有帮助, 感谢帮助 2014-01-11 19:32:11
建议你看看基因工程原理与技术这本书，上面很详细。你提到这些抗性基因在启动子调控下表达，启动子分很多类，有组成型表达的，也有诱导表达的。
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hehe
7楼2014-01-11 19:22:24
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Carnity

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-01-11 19:22:24
建议你看看基因工程原理与技术这本书，上面很详细。你提到这些抗性基因在启动子调控下表达，启动子分很多类，有组成型表达的，也有诱导表达的。

(⊙_⊙)
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8楼2014-01-11 19:30:43
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Carnity

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zheng1991 at 2014-01-11 16:59:27
还要有复制子 抗性筛选基因...

那如果我要构建一个质粒，使用诱导型启动子比如T7，那么我还应该添加阻遏基因对么，如果不添加阻遏基因，T7就会持续启动么……
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9楼2014-01-12 17:43:00
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JamesZu

铁杆木虫 (著名写手)
抗性只要基因前面有启动子就可以表达；
组成型启动子，即可以不用诱导；
那是一种筛选方法---蓝白斑筛选
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10楼2014-03-02 21:08:52
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