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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 怎么让质粒丢失
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李小同

木虫 (小有名气)

[求助] 怎么让质粒丢失 已有2人参与

求助一下各位虫友，我现在有一个菌，里边有两个质粒，分别是卡那霉素抗性和四环素抗性，能通过什么方法让这个四环素抗性的质粒丢失呢？只留下卡那霉素抗性的质粒。
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1楼 2014-06-26 17:24:31
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淘淘279

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
李小同(kx444555代发): 金币+2, 鼓励交流 2014-06-27 13:51:30
李小同: 金币+2, ★有帮助 2014-06-27 13:57:15
在只含卡那霉素的抗性筛选培养基上生长。扩培几代后另一个抗性质粒就丢失了

[ 发自小木虫客户端 ]
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你能做的永远不止这些！
3楼2014-06-26 22:40:26
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-06-26 22:09:00
李小同: 金币+2, ★有帮助 2014-06-27 13:57:07
高甘油保存的菌质粒易丢失。
假如是amp抗性的话，划线于抗生素平板，挑单菌，在比正常抗生素浓度稍低的液体培养基中超过20小时长时间摇菌（据文献，假如是amp的话，一般超过12小时，菌中即有一定比例的丢失质粒菌存在，以后随着抗生素失效，这些菌会占优势，其他抗生素就不知道了），取一定量菌液加甘油至50%体积，反复冻融几次，然后划线于无抗生素平板，挑多个单菌于无抗生素培养液中培养，摇浑后保留部分菌液，其余提质粒，对提不出质粒者进行鉴定。鉴定是否是大肠杆菌，鉴定有否抗生素抗性。注重严格无菌操作
只是本人的想法，不知对否，欢迎高手指正。
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-26 21:53:56
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