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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 纯化 蛋白降解？
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xiaoyu0127

铜虫 (小有名气)

[求助] 纯化 蛋白降解？ 已有5人参与

第一天用抗原抗体亲和层析，纯化得到的浓度虽然不高，但是western-blot能检测到。接下来反复过柱子，大概一个星期，将得到的蛋白溶液透析浓缩，可是western竟然检测不到了。很奇怪，难道是蛋白浓度低且在4度放了一个星期，蛋白降解了。浓缩条件是聚乙二醇20000，透析是4度PBS,个人认为也不会有问题，疑惑，求指点。
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1楼 2014-06-25 20:50:45
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elise1987

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
透析前后取样检测一下先。实验过程中最好分步留样，将来出问题好分析原因。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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不折腾，不胡闹，珍惜时间和生命
6楼2014-06-26 23:08:29
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