24小时热门版块排行榜    

查看: 1382  |  回复: 7

呀薯条

金虫 (小有名气)

[求助] 连接转化实验 已有5人参与

为了提高连接效率,我通常都是连接过夜。有个问题,一直很疑惑,想和大家讨论下:就是有时做到转化步骤,刚好是半上午或者中午,那这样涂好平板后,置于37度开始培养,到晚上11点左右,还只有 零星几个菌落,那我是这个晚上继续培养呢,还是室温放置,让它缓慢培养?因为要是仍置于37度的话,等到第二天早上,已经超过16个小时,可能会有卫星菌落产生,这个不是就会对阳性菌落的挑选有影响?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

seven拂晓

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-06-25 08:28:17
过夜连接的产物可以先放到4度冰箱里 多连几个小时不是事  我导师说他们以前都是16度连24小时,再4度连24小时的。下午3、4点再做转化吧
2楼2014-06-24 23:26:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
呀薯条(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-25 13:26:42
我用neb的连接酶,一般16度连个把小时,甚至就半小时,直接转化,效果一直挺好

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-06-25 08:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
呀薯条(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-25 13:26:58
你那个晚上室温放置,让它缓慢培养比较好。第二天早上一来,就长得挺大,挑单克隆,下午五点多提质粒,晚上酶切过夜,第二天跑胶检测。
4楼2014-06-25 08:55:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
呀薯条(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-25 13:27:09
呀薯条: 金币+2, 有帮助 2014-06-30 08:54:47
可以选择过夜连接后,在次日的下午3-4点中做转化,培养一夜时间能刚好的
5楼2014-06-25 09:55:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-06-25 08:55:50
你那个晚上室温放置,让它缓慢培养比较好。第二天早上一来,就长得挺大,挑单克隆,下午五点多提质粒,晚上酶切过夜,第二天跑胶检测。

楼主,想请教一下,挑了单克隆,在1ml离心管中扩培,提的质粒,浓度大致是多少,我的扩培十个小时左右,质粒浓度20-30ng,是不是太低了
踏实
6楼2014-07-15 17:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

泥鳅越钻越深

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


呀薯条(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-15 18:37:50
我之前是这么办的,效果没影响。就是涂完板之后先放那,或者先放一两个小时,晚上再放进去,一早来正好。
Decision Is So Important !
7楼2014-07-15 17:55:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by hajierlove at 2014-07-15 17:33:16
楼主,想请教一下,挑了单克隆,在1ml离心管中扩培,提的质粒,浓度大致是多少,我的扩培十个小时左右,质粒浓度20-30ng,是不是太低了...

挑单克隆后,在2mlLB中摇(含抗生素),最后用20ulTER溶解,每次我做约400-500ng/ul。
8楼2014-07-15 20:14:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 呀薯条 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856材料求调剂 +12 hyf hyf hyf 2026-02-28 13/650 2026-03-02 20:19 by hypershenger
[考研] 268求调剂 +7 简单点0 2026-03-02 9/450 2026-03-02 20:10 by 简单点0
[考研] 材料复试调剂 +5 学材料的点 2026-03-01 6/300 2026-03-02 20:01 by hypershenger
[考研] 306分材料调剂 +5 chuanzhu川烛 2026-03-01 6/300 2026-03-02 19:51 by 张晓芳0105
[考研] 求调剂 +10 yunziaaaaa 2026-03-01 11/550 2026-03-02 19:17 by caszguilin
[考研] 一志愿中石油(华东)本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-02 3/150 2026-03-02 18:54 by caszguilin
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-03-02 5/250 2026-03-02 18:38 by caszguilin
[考研] 接收调剂 +6 津萌津萌 2026-03-02 13/650 2026-03-02 18:34 by fengyuling00
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +6 pin8023 2026-02-28 8/400 2026-03-02 17:13 by 0854蹲调剂
[考研] 0856化工专硕求调剂 +15 董boxing 2026-03-01 15/750 2026-03-02 15:06 by 晃晃不许晃
[考研] 0856材料与化工,270求调剂 +8 YXCT 2026-03-01 9/450 2026-03-02 11:01 by 无际的草原
[考研] 化工专硕342,一志愿大连理工大学,求调剂 +6 kyf化工 2026-02-28 7/350 2026-03-02 10:56 by 无际的草原
[考研] 322求调剂 +3 熊境喆 2026-03-01 3/150 2026-03-02 08:44 by houyaoxu
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂; 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
信息提示
请填处理意见