24小时热门版块排行榜    

查看: 1384  |  回复: 7

呀薯条

金虫 (小有名气)

[求助] 连接转化实验 已有5人参与

为了提高连接效率,我通常都是连接过夜。有个问题,一直很疑惑,想和大家讨论下:就是有时做到转化步骤,刚好是半上午或者中午,那这样涂好平板后,置于37度开始培养,到晚上11点左右,还只有 零星几个菌落,那我是这个晚上继续培养呢,还是室温放置,让它缓慢培养?因为要是仍置于37度的话,等到第二天早上,已经超过16个小时,可能会有卫星菌落产生,这个不是就会对阳性菌落的挑选有影响?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

seven拂晓

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-06-25 08:28:17
过夜连接的产物可以先放到4度冰箱里 多连几个小时不是事  我导师说他们以前都是16度连24小时,再4度连24小时的。下午3、4点再做转化吧
2楼2014-06-24 23:26:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
呀薯条(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-25 13:26:42
我用neb的连接酶,一般16度连个把小时,甚至就半小时,直接转化,效果一直挺好

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-06-25 08:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
呀薯条(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-25 13:26:58
你那个晚上室温放置,让它缓慢培养比较好。第二天早上一来,就长得挺大,挑单克隆,下午五点多提质粒,晚上酶切过夜,第二天跑胶检测。
4楼2014-06-25 08:55:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzj926521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
呀薯条(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-25 13:27:09
呀薯条: 金币+2, 有帮助 2014-06-30 08:54:47
可以选择过夜连接后,在次日的下午3-4点中做转化,培养一夜时间能刚好的
5楼2014-06-25 09:55:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-06-25 08:55:50
你那个晚上室温放置,让它缓慢培养比较好。第二天早上一来,就长得挺大,挑单克隆,下午五点多提质粒,晚上酶切过夜,第二天跑胶检测。

楼主,想请教一下,挑了单克隆,在1ml离心管中扩培,提的质粒,浓度大致是多少,我的扩培十个小时左右,质粒浓度20-30ng,是不是太低了
踏实
6楼2014-07-15 17:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

泥鳅越钻越深

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


呀薯条(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-15 18:37:50
我之前是这么办的,效果没影响。就是涂完板之后先放那,或者先放一两个小时,晚上再放进去,一早来正好。
Decision Is So Important !
7楼2014-07-15 17:55:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by hajierlove at 2014-07-15 17:33:16
楼主,想请教一下,挑了单克隆,在1ml离心管中扩培,提的质粒,浓度大致是多少,我的扩培十个小时左右,质粒浓度20-30ng,是不是太低了...

挑单克隆后,在2mlLB中摇(含抗生素),最后用20ulTER溶解,每次我做约400-500ng/ul。
8楼2014-07-15 20:14:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 呀薯条 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 成果系统访问量大,请15分钟后再尝试。由此给您造成的不便,敬请谅解。 +7 xhuama 2026-03-02 8/400 2026-03-02 22:33 by taidy
[考研] 求调剂 +11 yunziaaaaa 2026-03-01 13/650 2026-03-02 21:59 by sunny81
[考研] 085602化学工程350,调剂,有没有211的 +4 利好利好. 2026-03-02 7/350 2026-03-02 21:46 by sunny81
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +5 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 9/450 2026-03-02 21:33 by sunny81
[考研] 化工335求调剂 +3 摸摸猫猫头 2026-03-02 3/150 2026-03-02 20:55 by 平凡的七月
[考研] 理学,工学,农学调剂,少走弯路,这里欢迎您! +5 likeihood 2026-03-02 8/400 2026-03-02 20:39 by ji493940045
[考研] 材料工程专硕283求调剂 5+5 ,!? 2026-03-02 7/350 2026-03-02 20:27 by hypershenger
[考研] 306分材料调剂 +5 chuanzhu川烛 2026-03-01 6/300 2026-03-02 19:51 by 张晓芳0105
[考研] 289求调剂 +8 yang婷 2026-03-02 9/450 2026-03-02 19:08 by zhukairuo
[考研] 268求调剂 +3 好运连绵不绝 2026-03-02 3/150 2026-03-02 19:05 by zhukairuo
[考研] 一志愿中石油(华东)本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-02 3/150 2026-03-02 18:54 by caszguilin
[考研] 化工京区271求调剂 +6 11ing 2026-03-02 6/300 2026-03-02 18:52 by caszguilin
[考研] 材料调剂 +3 恒顺自然 2026-03-02 3/150 2026-03-02 18:49 by L135790
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-03-02 5/250 2026-03-02 18:38 by caszguilin
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +6 ieewxg 2026-02-25 7/350 2026-03-02 12:44 by stidwellNK
[考研] 295求调剂 +8 19171856320 2026-02-28 8/400 2026-03-02 11:19 by yuchj
[考研] 281求调剂 +5 2026计算机_诚心 2026-03-01 8/400 2026-03-02 11:05 by 汪!?!
[考研] 材料调剂 +6 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 7/350 2026-03-02 10:42 by Jy?
[考研] 0854复试调剂 276 +4 wmm9 2026-03-01 6/300 2026-03-02 09:28 by 热情沙漠
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
信息提示
请填处理意见