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wjwangjuan

新虫 (小有名气)

[求助] 转化实验，噬菌斑？？ 已有2人参与

各位虫友们在做转化实验的时候见过这种情况吗，连接产物转化到DH5a中，培养15h后，长出很多白斑，大肠杆菌小且少，请问白斑是什么啊，出现这种状况的原因呢？？谢谢
转化实验，噬菌斑？？
IMG_20131213_125308.jpg
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1楼 2013-12-13 14:01:31
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-13 16:09:37
可以把你说的白斑圈出来，我看到全是菌落，你可能说的是那种卫星克隆吧，这是平板长时间过长和抗生素抗性不足造成的
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-12-13 14:41:09
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dulei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-01-27 00:06:47
你所说的“长出很多白斑”就是大肠杆菌的菌落。15个小时，DH5a会长的挺大的了，那是菌落，不是噬菌斑。你所说的“大肠杆菌小且少”，那些小的大肠杆菌是卫星菌落，不是你要的阳性克隆，是因为时间太长而长出来的卫星菌落。你挑那些大个的“白斑”做鉴定就可以。
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3楼2013-12-13 16:58:32
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wjwangjuan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dulei at 2013-12-13 16:58:32
你所说的“长出很多白斑”就是大肠杆菌的菌落。15个小时，DH5a会长的挺大的了，那是菌落，不是噬菌斑。你所说的“大肠杆菌小且少”，那些小的大肠杆菌是卫星菌落，不是你要的阳性克隆，是因为时间太长而长出来的卫星 ...

不是，那些斑是白色的，中间夹杂着大肠杆菌的单菌落，而且白斑的生长速度很快，约10h就很大像我图片里的。但是大肠杆菌的单菌落要很久，周围是有卫星菌落。再说一下白斑是很质厚的，大肠杆菌单菌落刚长出来是有一点透光率的，但是这个白斑很厚
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4楼2013-12-13 23:19:16
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wjwangjuan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-13 14:41:09
可以把你说的白斑圈出来，我看到全是菌落，你可能说的是那种卫星克隆吧，这是平板长时间过长和抗生素抗性不足造成的

我在图上圈好了，谢谢
转化实验，噬菌斑？？-1
1.jpg
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5楼2013-12-17 15:26:45
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wjwangjuan

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dulei at 2013-12-13 16:58:32
你所说的“长出很多白斑”就是大肠杆菌的菌落。15个小时，DH5a会长的挺大的了，那是菌落，不是噬菌斑。你所说的“大肠杆菌小且少”，那些小的大肠杆菌是卫星菌落，不是你要的阳性克隆，是因为时间太长而长出来的卫星 ...

那些大的菌落做了菌落PCR是假阳性的啊
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6楼2013-12-17 15:28:45
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