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wjwangjuan

新虫 (小有名气)

[求助] 转化实验,噬菌斑?? 已有2人参与

各位虫友们在做转化实验的时候见过这种情况吗,连接产物转化到DH5a中,培养15h后,长出很多白斑,大肠杆菌小且少,请问白斑是什么啊,出现这种状况的原因呢??谢谢
转化实验,噬菌斑??
IMG_20131213_125308.jpg
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gyesang

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-12-13 16:09:37
可以把你说的白斑圈出来,我看到全是菌落,你可能说的是那种卫星克隆吧,这是平板长时间过长和抗生素抗性不足造成的
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-12-13 14:41:09
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dulei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-01-27 00:06:47
你所说的“长出很多白斑”就是大肠杆菌的菌落。15个小时,DH5a会长的挺大的了,那是菌落,不是噬菌斑。你所说的“大肠杆菌小且少”,那些小的大肠杆菌是卫星菌落,不是你要的阳性克隆,是因为时间太长而长出来的卫星菌落。你挑那些大个的“白斑”做鉴定就可以。
3楼2013-12-13 16:58:32
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wjwangjuan

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by dulei at 2013-12-13 16:58:32
你所说的“长出很多白斑”就是大肠杆菌的菌落。15个小时,DH5a会长的挺大的了,那是菌落,不是噬菌斑。你所说的“大肠杆菌小且少”,那些小的大肠杆菌是卫星菌落,不是你要的阳性克隆,是因为时间太长而长出来的卫星 ...

不是,那些斑是白色的,中间夹杂着大肠杆菌的单菌落,而且白斑的生长速度很快,约10h就很大像我图片里的。但是大肠杆菌的单菌落要很久,周围是有卫星菌落。再说一下白斑是很质厚的,大肠杆菌单菌落刚长出来是有一点透光率的,但是这个白斑很厚
4楼2013-12-13 23:19:16
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wjwangjuan

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-13 14:41:09
可以把你说的白斑圈出来,我看到全是菌落,你可能说的是那种卫星克隆吧,这是平板长时间过长和抗生素抗性不足造成的

我在图上圈好了,谢谢
转化实验,噬菌斑??-1
1.jpg

5楼2013-12-17 15:26:45
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wjwangjuan

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by dulei at 2013-12-13 16:58:32
你所说的“长出很多白斑”就是大肠杆菌的菌落。15个小时,DH5a会长的挺大的了,那是菌落,不是噬菌斑。你所说的“大肠杆菌小且少”,那些小的大肠杆菌是卫星菌落,不是你要的阳性克隆,是因为时间太长而长出来的卫星 ...

那些大的菌落做了菌落PCR是假阳性的啊
6楼2013-12-17 15:28:45
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