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douxx

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[交流] 5‘ RACE时片段不完整已有3人参与

最近通过设计简并引物获得了目的基因的3’RACE片段，
再根据得到的3’RACE片段设计反向引物以得到5‘端，
但是对5’端测序后发现，均比预期的短几十个碱基。

有没有遇到过这种情况的，指点一下

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1楼 2014-06-11 21:38:34

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douxx

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2014-06-12 09:56:34
最好的办法是3‘RACE 加上5’染色体步移不要直接做5‘RACE 费时费力

染色体步移是不是跟巢式PCR一样？

10楼2014-06-24 10:52:05

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Neo2000

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只能说你的做法有点不走寻常路，也有可能你没说清楚，一般情况下，race完了要从头到尾扩一次，确保正确

[ 发自小木虫客户端 ]

2楼2014-06-11 22:26:33

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匿名

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3楼2014-06-12 09:56:34

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qsy1115

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引用回帖:

3楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2014-06-12 09:56:34
最好的办法是3‘RACE 加上5’染色体步移不要直接做5‘RACE 费时费力

你好，我刚接触分子方面，做过表达量。现在想学习下race克隆技术，有具体方法和注意事项么？感谢，qsy1115@sina.cn

4楼2014-06-14 17:32:51

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