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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 电泳条带不亮是什么原因
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zxlulurain

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳条带不亮是什么原因 已有10人参与

各位高手，我pcr产物跑电泳，用180V，40min，3%的胶跑的，但是包括marker（20bp）的条带都不是非常亮，各位给指点下
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1楼 2014-06-11 20:05:57
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

咸鱼~翻身

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by zxlulurain at 2014-06-11 20:23:26
胶浓度不对还是配胶时间的问题，还是加染料的问题呢，刚刚开始做实验问题比较多，谢谢啦...

燃料和样的比例对不对
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11楼2014-08-03 10:15:00
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-08-03 07:56:11
胶做的不好，染料都跑出去了，你还看什么

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-06-11 20:21:03
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zxlulurain

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-11 20:21:03
胶做的不好，染料都跑出去了，你还看什么

胶浓度不对还是配胶时间的问题，还是加染料的问题呢，刚刚开始做实验问题比较多，谢谢啦
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3楼2014-06-11 20:23:26
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-06-11 23:41:12
电压太高了，还跑了40分钟，大槽150V跑半小时也够了，可能你的染料都出去了，胶肯定不亮了。胶融的应该还可以。
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4楼2014-06-11 20:57:20
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-08-03 07:56:15
好像拍照时没有对好焦。
EB加的适当多一点也可以比较亮。
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5楼2014-06-11 21:46:26
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zxlulurain

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-06-11 20:57:20
电压太高了，还跑了40分钟，大槽150V跑半小时也够了，可能你的染料都出去了，胶肯定不亮了。胶融的应该还可以。

谢谢，我再按你的试试去
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6楼2014-06-11 22:45:16
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北化方华

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-08-03 07:56:20
不知道你的目的基因多大，我们一般用1%琼脂糖跑，90V，半小时，3kb差不多跑出来了。你的电压大了。
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7楼2014-08-02 19:42:34
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summit061800

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-08-03 07:56:23
150v,20-30min足够了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2014-08-02 21:19:24
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jonew

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-08-03 07:56:26
一般用1%琼脂糖跑,130-140v,20-30min足够了
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借口很贱，，，
9楼2014-08-02 22:40:16
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 北化方华 at 2014-08-02 19:42:34
不知道你的目的基因多大，我们一般用1%琼脂糖跑，90V，半小时，3kb差不多跑出来了。你的电压大了。

他这个是3％的胶，说明片段比较小，我觉得和电压和时间没有关系，可能是制胶的问题，看背景那么亮，EB加的有点多

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天道酬勤
10楼2014-08-03 09:50:31
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