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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】琼脂糖电泳条带不亮的原因
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pipi8421

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】琼脂糖电泳条带不亮的原因 已有12人参与

大家好，请教各位一个问题：我最近琼脂糖电泳条带不亮，MARKER也不亮，电泳液换的新的，电压60V，电泳时间47分钟，希望大家帮忙找找原因！
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1楼 2010-08-19 09:48:02
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):鼓励交流！ 2010-08-19 21:17:27
把胶倒薄点，适当增加上样量，你mark最亮的带式20ng/ul吗，上了几ul？
赞一下(2人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2010-08-19 09:51:35
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励 2010-08-19 16:09:03
1，上样量
2，染料
3，检测设备，尤其是激发波长和染料是否匹配
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3楼2010-08-19 09:56:10
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大变化

新虫 (初入文坛)
我们实验室一般电压都是采用130v左右，电泳20min！
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我期望自己能有一个大的转变！！！！
4楼2010-08-19 11:29:26
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小小豆豆

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+2):鼓励 2010-08-19 16:09:16
第1，增加上样量试一下
第2，制胶是否用的同样的电泳缓冲液，电泳液是否用的太久了
第3，更换泡胶的eb溶液
第4，检查凝胶观测设备，尤其是激发波长和染料是否匹配
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-08-19 12:46:19
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夜龙舞

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 小小豆豆 at 2010-08-19 12:46:19:
第1，增加上样量试一下
第2，制胶是否用的同样的电泳缓冲液，电泳液是否用的太久了
第3，更换泡胶的eb溶液
第4，检查凝胶观测设备，尤其是激发波长和染料是否匹配

这个答案很好。赞同。
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6楼2010-08-19 13:10:18
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晴空12108023

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+5):新人鼓励 常来 2010-08-19 16:09:29
我们一般是100v 40mA~~~电泳45分钟~~~
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7楼2010-08-19 13:29:41
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banhf

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
EB的原因呗，如果胶很厚的话就要适当延长染色时间，一般半个小时就足够了
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8楼2010-08-19 17:20:16
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pipi8421

银虫 (初入文坛)
我是把EB加到胶里了，制胶的时候加进去的，marker上样量是5ul。不知道电泳的过程中marker会不会因为电泳时间太长挥发掉了？
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9楼2010-08-26 08:45:35
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banhf

新虫 (初入文坛)
是染料太少了吧，加大量或换新的试试
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10楼2010-08-26 13:14:08
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