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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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uuu555000

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[交流] DNA琼脂糖电泳该注意哪些问题?

跑DNA琼脂糖电泳marker要么是w型要么是u型  该怎么办啊?
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weishengsu5

木虫 (正式写手)


胶做的不好吧
2楼2012-03-23 07:13:42
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zhaoghit

金虫 (正式写手)



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检查你的试剂和电泳仪是否有问题,另一个就是电压不要太高。没别的原因了
3楼2012-03-23 08:28:52
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uuu555000

捐助贵宾 (正式写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaoghit at 2012-03-23 08:28:52:
检查你的试剂和电泳仪是否有问题,另一个就是电压不要太高。没别的原因了

120v算不算高?
4楼2012-03-23 12:02:29
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tantingting

金虫 (小有名气)



uuu555000: 金币+1 2012-03-24 21:00:09
引用回帖:
4楼: Originally posted by uuu555000 at 2012-03-23 12:02:29:
120v算不算高?

不高,正常都120V
5楼2012-03-23 15:49:28
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
uuu555000: 金币+1 2012-03-24 21:00:20
胶和点样孔都有可能影响,造成你这样的结果
6楼2012-03-23 19:52:23
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a731705125

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们跑电泳都300~400V,不知道学姐是用的什么buff,跑得还蛮好。
7楼2012-03-23 21:24:24
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uuu555000

捐助贵宾 (正式写手)


引用回帖:
6楼: Originally posted by 跳跳鱼 at 2012-03-23 19:52:23:
胶和点样孔都有可能影响,造成你这样的结果

做胶到底该注意哪些问题?
8楼2012-03-23 21:52:25
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)



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你配的是百分之几的胶?你说120V电压,那个还很正常。跑出不规则形的条带,就有可能是你的胶配得不够均匀。如果是浓度大的胶,一定要在微波里面煮到透明为止,最后还可以补加一些buffer
9楼2012-03-24 11:28:54
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★ ★ ★ ★
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uuu555000: 金币+3 2012-03-24 21:01:24
胶一定要烧好,微波完最好立即拿起来晃晃匀,他那个东西容易结块。有时可以看下里面有没有小的颗粒,有的话说明琼脂糖没完全溶解。直到摇着就像里面是水的样子,一点杂质(小的白色颗粒)度没有才行。摇时注意点别烫着自己。
配角前把瓶子和梳子,槽子洗洗干净,以前的胶粘在在上面不好
电压不应该是问题,只要跑的过程中,你的buffer不发热就可以,除非你的电源不好忽高忽低的,或是你总在改他。
buffer,不行换点新的,时间长盐浓度会高

另外Maker用前可以甩一下,吸上面的,有的Maker可能会有杂质

[ Last edited by telomerase on 2012-3-24 at 21:08 ]
10楼2012-03-24 20:05:57
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)



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1. 胶的问题  没有融化完全,或者倒胶过晚,有部分凝固。
2. 缓冲液的问题   特别是TAE缓冲液比较容易失去缓冲作用,要经常更换,以前都是跑三次就换。
3. 电泳仪的问题  主要是电压,是否过高,是否恒定。
4. marker本身的质量问题  看别人也出现这种情况,验证一下是不是自己操作的问题。
11楼2012-03-25 22:35:23
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