应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】50bp以下DNA琼脂糖电泳的条件
161/1返回列表
查看: 2226  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

niliudeyu

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】50bp以下DNA琼脂糖电泳的条件

30bp单链DNA琼脂糖电泳，琼脂糖浓度4%，电压110V，DNA浓度1μM上样量10μl，gel image能隐约看到条带不明显,荧光很微弱,可以怎样优化一下？琼脂糖浓度太高，制的凝胶很多气泡，不知道降低一点是否可以？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-04-02 00:54:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-04-02 19:58:03
跑聚丙烯酰胺凝胶电泳吧，50bp以下琼脂糖凝胶电泳就不是很好分了。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-04-02 02:04:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yabxxh

木虫 (正式写手)
niliudeyu(金币+1): 2011-04-02 22:31:22
5.0试一下吧，和你的Marker保持一致
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-02 09:16:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
niliudeyu(金币+1): 2011-04-02 22:31:28
Page胶分离，像纯化引物一样。
赞一下 回复此楼
4楼2011-04-02 10:56:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ls2046

铁杆木虫 (职业作家)
用琼脂糖不容易吧
赞一下 回复此楼
5楼2011-04-02 19:22:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

六妖妖

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
琼脂糖胶浓度太大会很厚的。还是PAGE胶好用
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-04-06 11:45:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

niliudeyu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 六妖妖 at 2011-04-06 11:45:26:
琼脂糖胶浓度太大会很厚的。还是PAGE胶好用

确实 倒胶的时候很不好倒。。。
赞一下 回复此楼
7楼2011-04-06 13:56:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

睡着数绵羊

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果有条件的话可以把胶真空抽滤下，上样量可以多加些
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-04-06 23:07:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

UFOWUHAN

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-04-02 02:04:20:
跑聚丙烯酰胺凝胶电泳吧，50bp以下琼脂糖凝胶电泳就不是很好分了。

PAGE 之后怎么观察单链DNA?现在的染料不是只能检测双链DNA吗？
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-04-07 00:47:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by UFOWUHAN at 2011-04-07 00:47:58:
PAGE 之后怎么观察单链DNA?现在的染料不是只能检测双链DNA吗？

PAGE还分 native和denaturing的。。。。。

native是用来分离双链的。。

denaturing用来分离单链。。可以用银染，也可以用sybr green （与双链结合时呈绿色荧光，与单链结合时呈橙黄色）。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-04-07 01:00:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w.king124

金虫 (正式写手)
楼主做的是适体？
赞一下 回复此楼
11楼2011-04-07 09:15:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

UFOWUHAN

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-04-07 01:00:37:
PAGE还分 native和denaturing的。。。。。

native是用来分离双链的。。

denaturing用来分离单链。。可以用银染，也可以用sybr green （与双链结合时呈绿色荧光，与单链结合时呈橙黄色）。

学习了，
看了SYBR GREEN介绍，好像是含有单链的DNA显橙黄色。只有纯的单链DNA还能显橙黄色？染料可以与玻璃器皿结合，影响严重不，另外，看见GOLD-VIEW可以对单链DNA显红色。主要想问的是用PAGE纯化引物的问题？跑变性PAGE胶之后的检测，以及怎么从PAGE胶里面洗脱引物？
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2011-04-07 10:56:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by UFOWUHAN at 2011-04-07 10:56:47:
学习了，
看了SYBR GREEN介绍，好像是含有单链的DNA显橙黄色。只有纯的单链DNA还能显橙黄色？染料可以与玻璃器皿结合，影响严重不，另外，看见GOLD-VIEW可以对单链DNA显红色。主要想问的是用PAGE纯化引物的问题 ...

这个我问过技术支持，说是用自己配置的buffer浸泡胶条，将引物溶出。然后再用很短的C18柱子 还是什么进行浓缩。
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2011-04-07 11:15:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

niliudeyu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by w.king124 at 2011-04-07 09:15:22:
楼主做的是适体？

不是额
回复此楼
14楼2011-04-07 11:47:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

niliudeyu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by UFOWUHAN at 2011-04-07 10:56:47:
学习了，
看了SYBR GREEN介绍，好像是含有单链的DNA显橙黄色。只有纯的单链DNA还能显橙黄色？染料可以与玻璃器皿结合，影响严重不，另外，看见GOLD-VIEW可以对单链DNA显红色。主要想问的是用PAGE纯化引物的问题 ...

我的样品是单链ＤＮＡ　用SYBRGreenⅡ，显橙黄色，灵敏度比较高。不过与玻璃器皿结合？？这个不知道额　学习了
赞一下 回复此楼
15楼2011-04-07 11:53:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

UFOWUHAN

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by niliudeyu at 2011-04-07 11:53:35:
我的样品是单链ＤＮＡ　用SYBRGreenⅡ，显橙黄色，灵敏度比较高。不过与玻璃器皿结合？？这个不知道额　学习了

我没用过这种染料，只是在网站上看的介绍。你用的什么器皿染色的？
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2011-04-07 12:18:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 niliudeyu 的主题更新
161/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:07 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 08:06 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:52 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:32 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:27 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:07 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 3/150 2026-02-08 03:05 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 3/150 2026-02-08 02:52 by vs90ilomwc
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 02:45 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 3/150 2026-02-08 02:32 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:27 by vs90ilomwc
[教师之家] 有院领导为了换新车，用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗 +4 hitsdu 2026-02-06 4/200 2026-02-07 13:07 by jurkat.1640
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[考博] 天津大学招2026.09的博士生，欢迎大家推荐交流（博导是本人） +4 a793625982 2026-02-05 5/250 2026-02-07 10:57 by a793625982
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生｜MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[基金申请] 面上项目申报 +3 Tide man 2026-02-01 3/150 2026-02-05 22:56 by god_tian
[教师之家] 遇见不省心的家人很难过 +18 otani 2026-02-03 22/1100 2026-02-04 11:06 by tangmnt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭