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【求助/交流】50bp以下DNA琼脂糖电泳的条件
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niliudeyu
金虫
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虫号: 538087
[交流]
【求助/交流】50bp以下DNA琼脂糖电泳的条件
30bp单链DNA琼脂糖电泳,琼脂糖浓度4%,电压110V,DNA浓度1μM上样量10μl,gel image能隐约看到条带不明显,荧光很微弱,可以怎样优化一下?琼脂糖浓度太高,制的凝胶很多气泡,不知道降低一点是否可以?
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2011-04-02 00:54:55
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UFOWUHAN
新虫
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★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by
brightfuture01
at 2011-04-07 01:00:37:
PAGE还分 native和denaturing的。。。。。
native是用来分离双链的。。
denaturing用来分离单链。。可以用银染,也可以用sybr green (与双链结合时呈绿色荧光,与单链结合时呈橙黄色)。
学习了,
看了SYBR GREEN介绍,好像是含有单链的DNA显橙黄色。只有纯的单链DNA还能显橙黄色?染料可以与玻璃器皿结合,影响严重不,另外,看见GOLD-VIEW可以对单链DNA显红色。主要想问的是用PAGE纯化引物的问题?跑变性PAGE胶之后的检测,以及怎么从PAGE胶里面洗脱引物?
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12楼
2011-04-07 10:56:47
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brightfuture01
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★
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-04-02 19:58:03
跑聚丙烯酰胺凝胶电泳吧,50bp以下琼脂糖凝胶电泳就不是很好分了。
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2楼
2011-04-02 02:04:20
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yabxxh
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niliudeyu(金币+1): 2011-04-02 22:31:22
5.0试一下吧,和你的Marker保持一致
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3楼
2011-04-02 09:16:56
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zhuifeng7000
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虫号: 598143
niliudeyu(金币+1): 2011-04-02 22:31:28
Page胶分离,像纯化引物一样。
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4楼
2011-04-02 10:56:11
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