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EATY

铜虫 (初入文坛)

[求助] 急求大神帮忙!琼脂糖凝胶电泳的问题! 已有9人参与

刚开始做琼脂糖凝胶电泳,跑胶拖尾严重,Mark也拖尾。在网上找了一些原因,有说是电压太低了(最开始用的80V),把电压调到150V试过,还是一样。也有人说电泳液的问题,但我每次都是配的新电泳液(1*TAE)。琼脂糖也配过1.2%、1%的,Mark用的DL2000,试剂都是刚买没多久。已经重做了5、6次了,每次都一模一样,实在不知道什么原因了,求大神帮忙指导一下,不甚感激!

急求大神帮忙!琼脂糖凝胶电泳的问题!
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周大神

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
EATY(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-23 17:13:41
我也觉得,mark没问题,跑的还可以啊,应该还是东西不纯吧,杂质太多

[ 发自小木虫客户端 ]
面对阳光,努力生长
5楼2014-05-22 23:04:42
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meng_xu

铜虫 (小有名气)


EATY(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-23 17:13:52
应该是你DNA样本的问题,如果你用的是PCR样本,建议你优化优化条件
6楼2014-05-23 05:51:20
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by EATY at 2014-05-23 08:36:49
但是,mark第一个亮点到点样点有一段是黑的,这不算拖尾吗?我的是直接提取的DNA样品,不是PCR产物。...

这样的M不算拖尾,M拖尾的话整个泳道都是亮的。我觉得是你的DNA提的不行,可能没提出来。DNA就算拖尾了有一个带会很亮很亮,你这个都没有
10楼2014-05-23 09:34:05
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普通回帖

DAX1

新虫 (小有名气)

为啥我感觉你的胶像是用水配置的呢,呵呵
实在想象不出来有什么原因,琼脂糖不好?Loading buffer不好?
2楼2014-05-22 21:13:46
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EATY

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by DAX1 at 2014-05-22 21:13:46
为啥我感觉你的胶像是用水配置的呢,呵呵
实在想象不出来有什么原因,琼脂糖不好?Loading buffer不好?

用的50*TAE稀释50倍配的
我待实验如初恋,实验虐我千百遍
3楼2014-05-22 21:16:36
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-22 22:36:18
M不算拖尾吧,个人觉得不像是胶的问题,可能你的产物有问题。
4楼2014-05-22 22:14:20
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mehongyu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
EATY(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-23 17:14:10
能问一下你跑的是什么样本吗 可能是PCR产物的问题,建议你再跑的时候加一个以前跑过没问题的样本做对照,这样就能看出什么问题了

[ 发自小木虫客户端 ]

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

7楼2014-05-23 06:19:01
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EATY

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-05-22 22:14:20
M不算拖尾吧,个人觉得不像是胶的问题,可能你的产物有问题。

但是,mark第一个亮点到点样点有一段是黑的,这不算拖尾吗?我的是直接提取的DNA样品,不是PCR产物。
我待实验如初恋,实验虐我千百遍
8楼2014-05-23 08:36:49
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EATY

铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by mehongyu at 2014-05-23 06:19:01
能问一下你跑的是什么样本吗 可能是PCR产物的问题,建议你再跑的时候加一个以前跑过没问题的样本做对照,这样就能看出什么问题了

我跑的是直接提取后的DNA样品。
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9楼2014-05-23 08:42:23
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