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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】电泳条带看不见
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haichang

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】电泳条带看不见

用NEB BamHI-HF/NdeI酶切质粒(20ul体系，Buffer 4, 酶各0.5ul，37度，2h)，跑电泳什么也看不见了；换用Fermentas BamHI/NdeI双酶切(37度，16h)，PCR产物酶切后，条带还在，而pET-9a酶切后电泳什么也看不见了，用NdeI单酶切pET-9a电泳可看见正确条带，用BamHI/NdeI酶切载体(50ul体系，2×Buffer tango, 酶各1ul，37度，2h)就什么也看不见了，哪位高手帮帮忙解释下这是怎么回事呀，我该怎么办？
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时不我待
1楼 2010-08-10 16:34:08
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高陈冲

银虫 (初入文坛)
可能是酶的质量不好
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愿你出走半生，归来仍是少年
2楼2010-08-21 21:11:00
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320080920001

金虫 (正式写手)
没怎么看懂 楼主可以分一个先后顺序吗？1234啥的
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3楼2010-08-21 22:25:39
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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上
haichang(金币+1): 2010-11-05 15:32:50
求上质粒电泳图
质粒质量不好双酶切也容易降解了
或者是酶污染了
又或者双酶切酶量过多导致甘油含量过高，星星活性了
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终于熬成木虫了……
4楼2010-08-22 06:53:56
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黑色海浪

建议楼主图文并茂！！大家好解释！
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5楼2010-08-22 10:33:57
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j2

木虫 (正式写手)
你的载体上确定BamHI酶切位点只有一个
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
6楼2010-08-22 16:41:06
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louli

铜虫 (小有名气)
我有时候也出现过这种情况，你试试缩短时间，有时候时间长会切飞的，所以什么也看不到
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7楼2010-08-23 07:49:36
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梦想很重要

禁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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8楼2013-09-05 23:08:01
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